Samenvatting
Samenvatting Celcultuur vragen voorbereiding examen
Zelfgemaakte vragen ADHV de cursus.
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 12 pagina's
Voorbeeld 2 van de 12 pagina's
In winkelwagen
Voorbeeld van de inhoud
lOMoARcPSD|1917763VRAGEN + OPLOSSINGEN
Hoofdstuk 1 Inleiding, 2 Cultivatie en 3 Soorten culturen
1. Geef het verschil tussen continue en eindige of normale
cellijnen. Leg ze uit aan de hand van een tekening ( die grafiek).
Geef een voorbeeld van elke cellijn en geef van elke cellijn een
toepassing en de reden waarom deze voor die toepassing
gebruikt wordt.
Een continue cellijn is onsterfelijk gemaakt (geïmmortaliseerd)
door een proces genaamd transformatie. Dit wordt veroorzaakt
door al dan niet geïnduceerde transformaties. De cellen zijn
niet meer afhankelijk van celadhesie en zullen niet meer
verouderen waardoor ze onbeperkt kunnen blijven delen. Een
eindige cellijn is een gesubcultiveerde primaire cellijn die niet
onbeperkt kan delen maar vast hangt aan de hayflick limiet
(60). Door verkorting van de telomeren (niet bij stamcellen)
treed er senescentie op.
Eindige cellen: normale lichaamscellen (geen stamcellen door
telomerase)
Continue cellen: kankercellen
2. Wat zijn de verschillende glycoproteïnen voor celadhesie? Leg uit.
De verschillende proteïnen zijn selectinen, cadherinen, integrinen en immunoglobulines.
Selectine: 3 soorten (Epitheliaal, placentaal en lymfoid), cel-cel adhesie
Cadherine: calcium dependent, cel specifiek, 3 soorten (Neuraal, placentaal, epitheliaal), cel-cel adhesie
Integrine: cel-matrix adhesie, belangrijk voor inertne stuctuur
Ig- fam.: cel-cel adhesie
Cel-cel adhesie is belangrijk voor de celpolariteit, groei, vorm, activiteit, migratie,..
Cel-matrix adhesie is belangrijk voor voornamelijk de signaaltransductie
3. Geef de 3 verschillende manieren om cellen los te maken uit het weefsel en leg uit.
Spontane migratie: de meest mobiele cellen migreren eerst, weefselstukje cultiveren celuitgroei
Mechanisch: kan manueel met 2 scalpels of met een toestel met roterende messen en daarna trituratie
Enzymatisch: meestal met trypsine (veel meer cellen op korte tijd maar vaak celschade)
4. Wat is immortalisatie?
Immortalisatie is het proces waarbij een eindige celcultuur continu wordt gemaakt. Men gebruikt hiervoor vaak
SV40, EBVirus en het TERT gen. Het is ook wel transformatie genoemd.
5. Wat is iPSC?
iPSC staat voor Induced Pluripotent Stem Cells. Dit zijn gedifferentieerde cellen die met terug heeft
geprogrammeerd tot pluripotente stamcellen door overexpressie van 4 tf. Men gebruikt hiervoor meestal
fibroblasten.
6. Geef een voorbeeld van een kankercellijn
De HeLa cellijn is de meest bekende. Afkomstig van Henrietta Lacks haar baarmoeder halskanker.
7. Met welke factoren moeten we rekening houden om cellen te selecteren voor onderzoek?
1. Van welk species ze afkomstig zijn
2. Welke biologische functie ze hebben
3. Of we een continue of een eindige cellijn nodig hebben.
8. Wat zijn de voor en nadelen van een getransformeerde cellijn.
Voordelen zijn het langer en gemakkelijker doorkweken van weefsel. De getransformeerde cellen wijken meestal af
van het oorspronkelijke weefsel en hebben soms een heterogeen karyotype.
9. Wat zijn MRC-5 cellen?
humane fibroblasten afkomstig van het longweefsel van een 14 week oude foetus. Vaak gebruikte cellen in vaccin
productie.
10. Wat zijn de voornaamste verschillen tussen cellen in vivo en cellen in cultuur?
CULTUUR IN VIVO
2D 3D
Vaker delen Minder delen
1-2 soorten cellen blijven vaak over Alle cellen aanwezig
oversimplificatie Normaal
Gedownload door Pakita Van Puyenbroeck (pvpuyenbroeck@gmail.com)
, lOMoARcPSD|1917763
Cel-cel en cel- matrix interacties zijn anders Normaal
Geen systemische verbindingen Normaal
Meer glycolyse en minder citroenzuurcyclus Normaal
11. Wat is het verschil tussen een co-cultuur en een organotypische cultuur?
Een co-cultuur bestaat uit 2 verschillende cellijnen en is een 2D cultuur tenzij met een filterwell insert wordt
gewerkt. Een organotypische cultuur is met meerdere celtypes en er wordt een 3D cultuur gebruikt. Beide
behouden de cel-cel interacties. Er kan bij een bepaalde cellijn groeivoordeel zijn en er kan een paracrieneffect
voorkomen.
12. Geef 4 verschillende manieren van cultiveren en leg uit.
Een orgaancultuur, een explant cultuur, een organotypische cultuur en een primaire celcultuur (na subcultivatie
wordt dit een eindige celcultuur)
ORGAAN EXPLANT ORGANOTYPISCH CEL
Cellulaire interacties Cellulaire interacties Cellulaire interacties Maar beperkte tijd
houdbaar
Differentiatie mogelijk Veel weefsel 3D structuur Dedifferentiatie/senescenti
e
Karakterisatie easy Manipuleerbaar Paracrien effect Monolaag (co-
cultuur/zuiver)
Veel vers weefsel nodig Dedifferentiëren van Meerdere celtypes Geen weefselstructuur
want kunnen niet delen cellen
Houdbaarheid is kort Geen weefselstructuur
13. Wat zijn de voor en de nadelen van kweekculturen?
VOORDELEN NADELEN
Controle van omgeving Expertise nodig
Karakterisatie en homogeniteit Hoeveelheid
Kost Instabiliteit
Belangrijk voor onderzoek Cultuur/in vivo verschillen
14. Bespreek de 2 mogelijke behandelingen met trypsine
Koude trypsine en warme trypsine. Trypsine is schadelijk voor cellen aangezien het eiwitten kapot maakt. Dus niet
alleen de eiwitten voor celadhesie maar ook de membraaneiwitten. Hierdoor moet de contacttijd met actieve
trypsine zo kort mogelijk zijn maar de efficientie moet behouden worden. Trypsine werkt optimaal in bij 37°C. Men
kan dus de cellen behandelen met warme trypsine (trypsine EDTA oplossing) maar dit moet dan zo kort mogelijk
om de cellen zelf niet te beschadigen. Men kan ook cellen behandelen met koude trypsine. De protease activiteit
van Trypsine is niet actief bij 4°C waardoor de stof kan intrekken tussen de cellen. Na enkele uren wordt deze
geïncubeerd op 37°C maar voor een kortere tijd. De inwerking is beter en er is hierdoor ook veel minder
celschade. Oudere cellen hebben meer collageen en ondervinden minder celschade aangezien trypsine collageen
niet afbreekt. Zuivere trypsine heeft een mindere werking dan ongezuiverde.
15. Wat is het verschil tussen een primaire cultuur en een cellijn? Leg uit adhv de evolutie van een cellijn, en adhv een
tekening
Tekening van vraag 1. Een primaire celcultuur zijn de eerste geoogste cellen rechtstreeks vanuit het weefsel. Vanaf
ze gesubcultiveerd worden is dit een cellijn (eindig of continu)
16. Hoe kan je in een celkweek de gedifferentieerde eigenschappen van de cellen behouden?
Door een organotypische of een orgaancultuur te gebruiken of door cryopreservatie toe te passen.
17. Wat zijn de 3 belangrijke ontdekkingen waardoor celculturen doorbraken?
Trypsine, Cultuurmedium, antibiotica en antimyotica
18. Wat is een gedissocieerde celcultuur?
19. Wat is alfa-2 macroglobuline?
Dit is een eiwit dat in serum voorkomt en zorgt voor de neutralisatie van trypsine
20. Na hoelang zijn de cellen vastgehecht en hoe gebeurd de aanhechting?
Na 72u …
Gedownload door Pakita Van Puyenbroeck (pvpuyenbroeck@gmail.com)
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper Patricia1234. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €4,39. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 67096 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen