Antwoorden op hele lijst mogelijke examenvragen van histologie. Zelf behaalde ik 18/20 op het examen door onder andere deze lijst te leren. Heel volledig + duidelijk!
Histologie mogelijke examenvragen + antwoorden
Microscoop
Wat bepaalt het oplossend vermogen van een microscoop? Vergelijk
lichtmicroscopie (LM) met elektronenmicroscopie (EM)!
De resolutie (= oplossend vermogen) is de kleinste afstand waarbij twee punten op een
coupe als afzonderlijk kunnen worden waargenomen. Men kan dit weergeven met de
volgende formule:
K∗λ
R=
NA
Hierbij is NA de numerieke apertuur van de objectieflens en λ de golflengte.
Hierbij is NA de kwaliteitswaardemeter van het objectief en wordt als volgt gedefinieerd :
NA =n∗sinμ , hierbij is n de brekingsindex van het medium en μ de halve tophoek van de
apertuurkegel.
Dus hoe groter de NA en hoe kleiner de golflengte, hoe beter de resolutie (want deze heeft
dan een kleinere waarde)!
Bij een lichtmicroscoop is de λ=550 nm en heeft men een vergroting van ongeveer 1000X.
De resolutie is hierbij 0,2micro meter !
Bij een elektronenmicroscoop is de λ=0,005 nm en kan de vergroting gaan tot 450000X. De
resolutie is hierbij 0,1nm!
Met een elektronenmicroscoop kan je dus meer gedetailleerd kijken bv naar organellen van
de cel. Dit gaat niet met een lichtmicroscoop.
Wat is een dichroïsche spiegel, hoe werkt het principe en in welke soort
microscopie wordt dit gebruikt?
Bij de fluorescentiemicroscopen speelt vooral de dichroïsche spiegel een belangrijke rol. De
dichroïsche spiegel staat onder een hoek van 45° ten opzichte van de invallende lichtstraal.
De spiegel reflecteert het kortgolvige licht en laat licht van lange golflengten door.
,Vergelijk de voorbereidingsprotocols voor weefsels bedoeld voor lichtmicroscopie en voor
transmissie elektronen microscopie.
Lichtmicroscoop:
Het orgaan of weefsel dat voor microscopisch onderzoek wordt geselecteerd, wordt uit het
dier verwijderd en gefixeerd door perfusie (via de bloedbaan) of immersie (onderdompelen)
in bv. formaldehyde. Dit fixatieproces is noodzakelijk om degradatie van het weefsel door
bacteriën en enzymen (autolyse) tegen te gaan. Fixatie kan gebeuren door chemische
verbindingen (cross-linking) tussen het fixatief en de in het weefsel aanwezige biomoleculen.
Door fixatie blijft de (ultra)structuur van het weefsel bewaard.
Na deze stap wordt het gefixeerde weefsel eerst gespoeld, vervolgens gedehydrateerd in
een aantal baden met een oplopende concentratie van ethanol en tenslotte via een aantal
tussenstappen ingebed in paraffine.
Het met paraffine geïmpregneerde weefselblokje wordt in de houder van een microtoom
geplaatst, een apparaat dat (zoals de naam doet vermoeden) zeer dunne schijfjes van het
weefselblokje snijdt. “Zeer dun” betekent in dit geval ongeveer 2 tot 7 µm dik. Dit schijfje (=
coupe/weefselsnede) wordt nu op een draagglaasje opgevangen en gedeparaffineerd met
behulp van xyleen. Via een omgekeerde alcoholreeks wordt het weefsel opnieuw in een
waterig milieu gebracht om vervolgens gekleurd te worden.
Kleuring is noodzakelijk om contrast te bekomen, want niet-gekleurd weefsel heeft ongeveer
dezelfde brekingsindex als glas en zou bijgevolg in de gewone lichtmicroscoop met
doorvallend licht weinig zichtbaar zijn. Het kleuringsproces verleent kleur aan het weefsel,
waardoor de verschillende structuren kunnen worden gedifferentieerd.
Na de kleuring zal de nu gekleurde coupe opnieuw ontwaterd (gedehydrateerd) worden
(door opnieuw een stijgende alcoholreeks te gebruiken) om vervolgens ingesloten te worden
met een niet-waterig inbeddingsmedium (bv. Permount) om uitdroging te voorkomen.
De coupe is nu klaar om bekeken te worden in het microscoop.
,Elektronenmicroscoop :
Voor transmissie elektronenmicroscopie mogen weefselblokjes slechts 1 mm3 groot zijn.
Enkel op die manier is de fixatie goed genoeg om de ultrastructuur van het weefsel te
bewaren fixatie door bv immersiefixatie met 3% glutaaraldehyde en postfixatie met
osmiumtetroxide.
Na het spoelen van de weefselblokjes worden ze ontwaterd in een stijgende aceton- of
ethanolreeks en ingebed in inbedmiddelen met een veel hogere hardheid dan parafine (bv.
epoxyharsen) in gelatinecapsules. Weefselsneden (50 nm) worden gemaakt met een
ultramicrotoom die glas- of diamantmessen bevat. Ze worden opgevangen op een koperen
roostertje (gridje), dat meestal bedekt is met een draagfilm. Het koperen gridje past perfect
in de specimenhouder van de TEM.
Omdat biologische materialen weinig verschillen in doorlaatbaarheid van elektronen
bevatten, zouden er zonder voorbehandeling contrastarme beelden ontstaan. Om die reden
worden de coupes ‘gecontrasteerd' met behulp van zware metalen (zoals osmium en
loodcitraat) die zich selectief binden aan bepaalde structuren (bv membranen). In de
elektronenmicroscoop kunnen we immers enkele grijswaarden waarnemen en geen kleuren.
Het ‘contrasteren’ is hier dus een alternatief voor het ‘kleuren’ in de lichtmicroscopie.
Een alternatief preparaat kan gemaakt worden met behulp van de vriesbreektechniek.
, Bindweefsel
Bespreek de opbouw van de grondsubstantie.
De grondsubstantie vormt de verbinding tussen de cellen en vezels in het BW.
De grondsubstantie bestaat uit een vaste grondsubstantie met hieraan gebonden
watermoleculen. Door zijn hoge viscositeit belemmert de grondsubstantie ook de
verspreiding van bacteriën en vreemde partikels.
Deze vaste grondsubstantie bestaat uit :
o Proteoglycanen
= centrale eiwitketen hierop glycosaminoglycanen gebonden. Deze
glycosaminoglycanen (GAG’s) zijn polysachariden, opgebouwd uit een lange keten
van dissachariden elk bestaande uit een uronzuur en hexosamine. Deze GAG’s zijn
ook zeer hydrofiel. Enkele voorbeelden van GAG’s zijn hyaluronzuur, heparansulfaat,
chondroïtinesulfaat, dermatansulfaat en keratansulfaat.
o Glycoproteïnen
= complex van proteïnen en koolhydraten (eiwit domineert hier meer!)
Bv;
Fibronectine aangemaakt dr epitheel-en bindweefselcellen, bindt met
GAG’s/cellen/collageen en is dus belangrijk in adhesie!
Lamininen hechting van epitheelcellen aan basaal membraan
Chondronectine aangemaakt door kraakbeencellen en hecht deze aan type 2
collageen.
Bespreek de verschillende vezeltypen die voorkomen in bindweefsels.
o Collageenvezels
Dit zijn de voornaamste BW vezels. Ze worden geproduceerd door meerdere
celtypes. Meestal zijn ze gerangschikt in bundels. Dit type vezel biedt de meeste
weerstand tegen trekkrachten = heel taai, sterk en weinig rekbaar!
Ze zijn voornamelijk opgebouwd uit glycine, proline, hydroxylysine en
hydroxyproline. Op basis van deze samenstelling onderscheiden we ook nog
verschillende types collageen. De meest voorkomende zijn de types 1-4.
Opbouw collageen : tropocollageen = basismolecule door polymerisatie en
crosslinking fibrillen samengevoegd tot vezels kunnen een collageenbundel
vormen.
o Reticulaire vezels
= opgebouwd uit collageen type 3!! Hier worden geen bundel gevormd maar fijne
netwerken.
Basisfibrillen van tropocollageen bundelen tot reticulinevezels!
Dit type collageen gaat ook erg associeren met de proteoglycanen en glycoproteïnen.
o Elastische vezels
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper margotUA. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €10,99. Je zit daarna nergens aan vast.
