Samenvatting
Samenvatting Basis Eiwitzuivering en analyses
- Vak
- Instelling
Document is een samenvatting van het vak eiwitzuivering en analyses waarbij basistechnieken zoals kolom chromatografie en elektroforese aan bod komen
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 13 pagina's
Voorbeeld 2 van de 13 pagina's
In winkelwagen
In winkelwagen
Verkoper
Volgendaphnevandijk
Ontvangen beoordelingen
Voorbeeld van de inhoud
Samenvatting eiwitzuivering en analyseBron met eiwit → homogeniseren + stabiliseren → centrifugeren + filteren → zuiveren → analyseren
Adsorptie → heterogenen reactie waarbij verontreinigde
componenten gebonden worden aan absorbent, ook wel
kolom.
Absorptie → vasthouden van iets, opnemen
Gezuiverde eiwitten kunnen gebruikt worden voor:
- Studeren van enzymatische functies en regulering
- Onderzoeken van eiwit interacties
- Produceren van antistoffen
- 3D structuren
- Productie van agentia en enzymen
Basis technieken
Er zijn 20 verschillende aminozuren die overal terug te vinden zijn alleen met een andere
aminozuurvolgorde. Aminozuren bestaan uit een aminogroep, een carbon groep en ze hebben een
restgroep. De restgroep is vaak belangrijk voor het scheiden op eigenschappen.
Eigenschap Methode Wat houdt het in
Oplosbaarheid Precipitatie met ammoniumsulfaat Fysisch-chemisch proces waarbij er
gekeken wordt naar neerslag die
ontstaat
Grootte Size exclusion chromatography Scheiding op molecuul grootte
Iso-elektrisch punt Ion exchange chromatography Scheiding op lading
Specifieke binding Affinity chromatography Scheiding op specifieke bindingen.
Als je eiwitten gaat zuiveren loop je altijd tegen kleine dingen
aan…
1. Als je iets heel zuiver wilt hebben is dat vaak ten koste van
opbrengst, maar de kosten gaan omhoog.
2. Als je veel opbrengst wilt hebben is dit vaak minder zuiver
en zijn kosten soms ook lager.
3. Als je een bedrijf hebt waar kosten belangrijk zijn, en alles zo
goedkoop mogelijk moet gaat dit zowel ten koste van de
zuiverheid als van de opbrengst.
Dus alles staat met elkaar in verbinding.
, Unit → hoeveelheid enzymen die in 1 min per 1µmol substraat zitten.
Tot. Activiteit → totale hoeveelheid
die je na een zuiveringsstap
overhoudt; in totaal U
Specifieke activiteit → U/mg →
activiteit in hoeveelheid eiwit
Recovering → percentage
overgebleven activiteit na een
𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒 𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑒𝑖𝑡 𝑛𝑎
zuiveringsstap ; 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒 𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑒𝑖𝑡 𝑣𝑜𝑜𝑟 ∗
100%
Zuiveringsfactor → verhouding specifieke activiteiten na t.o.v. van zuivering vooraf;
𝑠𝑝𝑒𝑐𝑖𝑓𝑖𝑡𝑒𝑖𝑡𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑒𝑖𝑡 𝑛𝑎
𝑠𝑝𝑒𝑐𝑖𝑓𝑖𝑡𝑒𝑖𝑡𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑒𝑖𝑡 𝑣𝑜𝑜𝑟𝑎𝑓
Voorbeeld:
Aantal ml Totaal eiwit gehalte Enzymactiviteit (U/ml)
(mg/ml)
Voor zuivering 100 1*100 = 100 O,5
Na zuivering methode 25 1,3 *25 = 32,5 1,92
1
Na zuivering methode 0,4 0,1 *0,4 = 0,04 5
2
Totale activiteit
- Voor = 100 * 0,5 = 50 U
- Na methode 1 = 25 * 1,92 = 48 U
- Na methode 2 = 0,4 * 5 = 2 U
Recovery
- Methode 1 = 48/50*100% = 96%
- Methode 2 = 2/48*100% = 4%
Specifieke activiteit
- Methode 1 = 48/32,5 = 1,48 U/mg
- Methode 2 = 2/0,04 = 50 U/mg
Zuiveringsfactor
- Methode 1 = 1,48/0,5 = 2,96 keer zo zuiver
- Methode 2 = 50/0,5 = 100 keer zo zuiver
Homogeniseren → cellen kapot maken (lyseren) → kijken of je met een celwand te maken hebt of
celmembraan.
Methodes:
- Mechanische lysis
o Hoge druk
o Parelmolen
- Fysische lysis
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper daphnevandijk. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €7,49. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 78600 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen