Samenvatting
VOLLEDIGE samenvatting celcultuur en ELISA
VOLLEDIGE samenvatting celcultuur en ELISA gegeven door prof. Paul Cos
[Meer zien]Voorbeeld 3 van de 78 pagina's
Voorbeeld 3 van de 78 pagina's
In winkelwagenVerkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
celcultuur en immunochemieH1: inleiding
begin: kikker weefsel dat men ging isoleren en proberen levend te houden
↪ waarom kikker: we kunnen het op kamertemperatuur levend houden, geen
incubator
MAAR problemen als we naar aparte cellen willen gaan
enkele vereisten:
↪ 3 belangrijke ontdekkingen
1) ontdekking antibiotica
2) trypsine -> om cellen los te maken van cultuurflessen
3) ontwikkeling van chemisch gedefinieerde cultuurmedia
- hoe steriel houden? → antibioticum
eerste antibioticum = penicilline
- hoe kunnen we de cellen wel apart krijgen → trypsine toevoegen (een
enzym/protease) → maakt cellen los
- ook cultuurmedia nodig voor aanvoer voedingsstoffen: water + extra stoffen (glucose,
vitamines, …)
polio virus:
= kinderverlamming
= naakt virus = RNA virus
↪ groot probleem in de jaren 40-50
↪ grote doorbraak in de jaren 50 -> eerste keer het poliovirus gekweekt in
celcultuur
virussen = 30-300 nm
↪ eiwitmantel waar genetisch materiaal in zit (RNA virus)
bezit spikes -> glycoproteïne antenne die nodig is om te binden met de receptor v/d cel
↪ hoe maken we het vaccin?
- optie 1: alle virussen worden gecollecteerd en inactief gemaakt
=> dmv formaldehyde -> zorgt voor behoud van structuur maar dood organisme
(hierdoor kan het immuunsysteem goed functioneren)
=> combinatie van een aminozuur en formaldehyde -> enzymen kunnen niet
functioneren → geïnactiveerd vaccin
1
, - optie 2: levend verzwakt vaccin
↪ vermenigvuldiging om het zwakker te maken
↪ zorgen dat enkel het virus kan groeien in celcultuur en niet in lichaam
we hebben veel virus nodig om een vaccin te kunnen ontwikkelen
virus: obligaat intracellulair -> heeft een cel nodig om aan te tasten
HELA cells -> kankeronderzoek
= cellen van de baarmoederhals
nadeel = hela cellen zijn wijd verspreid en besmetten soms ook andere cellen
hybridoma-technologie:
hoe kunnen we antilichamen produceren?
=> B-cellen maken antilichamen aan
B-cellen zullen afsterven als we ze proberen te retrieven, hiervoor hebben we een oplossing
nodig
↪ in de muis spuiten we een antigen en dan gaan we de B-cellen kunnen isoleren
gevolg: B-cellen die een antilichaam aanvallen
probleem: heeft een eindige levensduur
→ smelten samen tot een tumorcel = blijvend groeiend
sommige B-cellen zullen ook “foute” antilichamen aanmaken die niet zullen passen
hybridomas: B-cellen die geen eindige levensduur hebben
↪ polyethyleenglycol toevoegen aan B-cellen om een tumorcel beter te fusioneren
volgende stap
→ antigeen coaten waardoor we enkel de goede hybridomas overhouden (alle plasmacellen
bij elkaar gooien in een antigen)
2
, samengevat
1) Antigeen wordt ingespoten → muis begint antilichamen te produceren
2) Milt wordt weggenomen B-cellen (= cellen die antilichamen aanmaken)
worden geïsoleerd
3) Aanmaak hybride cel = hybridoma door tumorcel en B-cel te laten fuseren
Hybridoma = B-cellen die eeuwig (nodige) antilichamen kunnen produceren
Polyethyleenglycol wordt toegevoegd aan B-cellen en tumorcel om beter te fusioneren
4) Antigen coaten alle plasmacellen samen gooien bij antigen en enkel goede hybridomas
selecteren (=Hybridomas gescreend en gewenste antilichaam geselecteerd, de anderen
worden weggewassen)
5) Antilichaam-producerende hybridoma worden gekloond
6) Gekloonde cellen worden verwijderd, enkel nodige antilichamen blijven over
cel en weefseltechnologie:
DOEL: Het verkrijgen van (bio)implantaten om uitgevallen of slecht werkende organen en
weefsels te ondersteunen of te vervangen
Vooral amputaties bij diabetes
=> slechte doorbloeding zorgt voor slechte genezing van wonden
Diabetes type I: eilandjes van langerhans functioneren niet of slecht
- oplossing: scaffold: blauwe gel: plaatsen die ervoor gaat zorgen dat ze wel op actief
worden gezet
hoe gaan we aparte delen in celcultuur brengen? ->
1) weefsel kapot maken
2) nu verkrijgen we allemaal aparte cellen die in een cultuurfles worden gebracht
3) stukje plastic; substraat waar cellen op zullen vasthechten
4) uitspreiden en groeien tot een monoloog, na ong een week -> afsterven
=> oplossing trypsine = zorgt ervoor dat cellen niet afsterven
5) subcultivatie of passage = cellen in een nieuwe cultuurfles brengen
voordelen
- controle van de omgeving
fysico chemische parameters:
● pH (7.2), temp (37°C), osmotische druk (isotoon -> 0,9% NaCl), O2 (21%) en
CO2 (0,03%)
fysiologische parameters:
● voedingsstoffen ( +% serum)
-> meeste cellen hebben echter een supplement nodig in hun media om te kunnen
delen
3
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper biomed124. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €8,99. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 64438 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen