Links: dot plot. Ieder puntje stelt 1 cel voor die
gegamalyseerd wordt. Waarde wordt bepaald door licht. Je
kijkt niet naar fluorsescentie van cel zelf maar cel die
antistof bindt en fluoresecend gemerkt wordt of cel die
niet fluoresecent gemerkt wordt. Bepaalde stof gebonden
dus merker op oppervlak dus gebonden.
Je kijkt naar 2 merkers tegelijkertijd. Het is logaritmische
opgebouwd
Y as is sidescatter en x as is fluocroom (zie verder)
Rechts: histogram. Je wilt bv kijken of cellen CD positief zijn. Je ziet dan alle cellen die positief zijn. Je voegt altijd een negatieve
controle toe, meestal weergegeven aan linker kant als blauw lijntje.
Flow cytometer: in het toestel heb je een lichtbron (UV licht om fluocromen te activeren), detectoren (meten als cel voorbij
komt, welke energie die cel uitstraalt), cellen in suspensie bekijken (cellen die rondrijven die we kunnen opzuigen)
Als die cellen worden opgezogen is dat eerst een brede buis, alle cellen zitten bij
elkaar. Je wilt alle cellen na elkaar in single flow terechtkomen. Dat is cruciaal want je wilt
alle cellen 1 voor 1 analyseren. Voordeel als alle cellen apart zijn dat je ze 1 voor 1 kan
bestralen met licht.
Fluidics system:
Voordeel als alle cellen apart zijn dat je ze 1
voor 1 kan bestralen met licht .
Detectoren kunnen zichtbaarlicht detecteren
1. forwardscatter. Als cel door
lichtbundel voorbij komt meet de
detector de reductie in licht
densiteit
2. Sitescatter: licht dat verstrooid
wordt loodrecht op lichtbron meten,
als er geen verstrooiing is is de ssc 0.
Als er cel voorbij komt is er licht
verstrooiing. Licht verstrooiing is
afhankelijk van granules, zijn allemaal kleine lensjes die zorgen voor licht verstrooiing
Forward scatter FSC: licht dat tegengehouden wordt
, SSC: verstrooiing dat we krijgen
Dot plot (multiparametric)
Rechts boven: granulocyten
Midden gemengde populatie met
meeste immuuncellen: monocyten,
macrofagen . Niet meer te
onderscheiden met side en forward
scatter
Links: debries, kapotte cellen
Fluorescence (FL)
Elke antistof gebonden met specifiek fluocroom
De 2 scatters laten toch wel een onderscheid toe tussen moocyten,
lymfocyten, granulocyten
Links: je hebt populatie cellen en je test die voor bepaalde
merker. Als het dier niet geïnfecteerd of gevaccineerd is laat die
merker niet tot expresssie. Grootste deel van populatie zit links,
beschouw je als negatief, maar een klein deel van de cellen is
positief.
Toepassing praktijk: forward en site scatter cd4 en cd8
CD4 als merker: t helpercel
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper diergeneeskundeUAntwerpen. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €3,99. Je zit daarna nergens aan vast.