Samenvatting practica microbiologie - leerstof voor practicumtoets! 3e Ba DGK UA: alles te kennen voor practicumtoets op einde practica microbiologie + examenleerstof!
BACTERIOLOGIE
BASISTECHNIEKEN
Transfer van micro-organismen
Algemeen
Aantal cellen = inoculum overgebracht (inoculeren)
Aseptische wijze
Vast of visceus materiaal mbv entlus/entoog
Fungi: entnaald
Entnaalden na inoculeren geflambeerd tot gloeiend rood (2 seconden, niet langer)
Flamberen: verticaal in vlam houden
Vloeibaar bacteriemateriaal: pasteurpipetten, indien aantal druppels overenten
Beënten van een agarplaat: methode van de vijfhoek
Telkens 6 evenwijdige lijnen uitstrijken
Laatste zijde van de vijfhoek lijnen zigzag uitstrijken tot in midden agar
Laatste zone geen contact met eerste zone
Beënten van agarplaat: homogeen
Kiemen centripetaal let een entoog zigzag verspreiden over vaste
voedingsbodem
Druppel homogeen uitspreiden met gebogen pasteurpipet
Pipetteren
Wanneer volume niet van belang is: entoog om bacteriesuspensie op agar over te brengen
Wanneer volume van belang is: pasteurpipet, gegradueerde pipet of micropipet
Pasteurpipet: geen markeringen (druppels)
Gegradueerde pipet: verdunningsreeksen maken + bolpeer of pipet aid
Micropipet + wegwerptip: voor kleine volumes
Concentratiebepaling via plaattelling
Plaattelling en membraanfiltratie
Kiemgetal suspensie = bacteriële concentratie van deze suspensie
Plaattelling = Viable Plate Count Method = CFU – telling
CFU = colony forming unit = aantal levende kiemen, indien elke kolonie afkomstig is van 1
levende kiem – rekening houdend met verdunning
Sommige M-O groeien in aggregaten: cellen groeperen waardoor 1 kolonie afkomstig kan zijn
van verschillende levende cellen
o Streptococcen zullen vaak als diplococ voorkomen, waarbij dus 2 bacteriën
samenhangen
o onderschatting van aantal levende kiemen
CFU-waarde is betrouwbaar wanneer tussen 20 – 200 CFU’s op volledige agarplaat
o Tussen 10 – 100 CFU’s op halve agarplaat
o < 20 CFU’s onbetrouwbaar: statistische fout te groot
o > 200 CFU’s onbetrouwbaar: kolonies vloeien in elkaar
, Staal hoge CFU-waarde verwacht: verdunningsreeks
Staal lage CFU-waarde verwacht: opconcentreren door membraanfiltratie
o Filter met poriegrootte 0,22 micrometer; alle bacteriën blijven achter op filter
o Filter toegevoegd aan groeimedium kolonies laten groeien
Turbiditeit
Sneller, minder nauwkeurig
Optische densiteit = turbiditeit
Kiemen in vloeibaar medium groeien = medium troebel maken
Spectrofotometer concentratie bepalen
Oud bacterieel staal is ook troebel ! geen onderscheid tussen levende en dode kiemen
Telkamer
Microscopie
Telkamer met gekend volume bacteriële suspensie
Kan enkel wanneer bacteriën relatief stil liggen bacteriën met flagel
In real time bekijken: je ziet het aantal bacteriën + onderscheid maken tussen levende en
dode kiemen
Kleurstof tripaanblauw: levende bacteriën zullen kleurstof actief uit hun cytosol pompen =
ongekleurd. Dode bacteriën kunnen dit niet meer = blauw aangekleurd
INHIBITIE VAN MICROBIËLE GROEI
Antibiotica
= stoffen, ofwel door micro-organismen ofwel semi-synthetisch geproduceerd
Begrippen
Breed-spectrummiddelen: zowel G+ als G-
Smal-spectrummiddelen: tegen G+ of G-
Bacteriostatisch: bacteriegroeiremmend
Bactericide: bacteriedodend
MIC = minimum inhiberende concentratie: laagste concentratie van AB stof die
groeiremmend werkt
MBC = minimum bactericide concentratie: laagste concentratie van AB stof die
bacteriedodend werkt
Effecten van AB op bacteriecultuur in vitro
Na bepaalde inwerktijd worden de bacteriën geremd of gedood
Sommige bacteriën kunnen ontsnappen aan de invloed van het AB en zullen persisteren;
deze persisterende bacteriën kunnen dan weer uitgroeien (grafiekjes)
Belangrijkste bactericide AB: penicilinen, cefalosporinen, aminoglycosiden en fluoroquinolonen
Interacties
Synergisme: middelen versterken elkaars werking (som effecten groter dan apart)
Antagonisme: middelen verminderen elkaars werking
Indifferentie: middelen beïnvloeden elkaars werking niet
Disk diffusie / Kirby-Bauer test
Antibacteriële activiteit van een AB
KWALITATIEF
M-O in contact met AB, geïmpregneerd op een papierschijfje
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper decuypermarie. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €5,69. Je zit daarna nergens aan vast.
