100% tevredenheidsgarantie Direct beschikbaar na betaling Zowel online als in PDF Je zit nergens aan vast
logo-home
Samenvatting Genoom (BMW21614) €5,49   In winkelwagen

Samenvatting

Samenvatting Genoom (BMW21614)

 4 keer bekeken  0 keer verkocht
  • Vak
  • Instelling

Samenvatting van het vak Genoom (BMW21614) van Biomedische Wetenschappen. Bevat de volgende onderwerpen: PCR, restrictie-enzymen, DNA-gelelectroforese, genomische banken en cDNA banken, overexpressie, fusie-eiwitten, reporter-genen, Sanger sequencing, Next Generation Sequencing, DNA-klonering, plaa...

[Meer zien]

Voorbeeld 2 van de 7  pagina's

  • 24 maart 2023
  • 7
  • 2018/2019
  • Samenvatting
avatar-seller
DNA-technieken
 Onderzoek
o PCR
o Restrictie-enzymen
o DNA-gelelectroforese
o Genomische banken en cDNA banken
o Overexpressie
o Fusie-eiwitten
o Reporter-genen
o Sanger sequencing
o Next Generation Sequencing
 Manipulatie
o Restrictie-enzymen
o DNA-klonering
o Plaatsgerichte mutagenese
o Overexpressie
o RNA-interferentie (shRNA’s)
o CRISPR/Cas9 gene editing

RNA-technieken
 In-situ hybridisatie
 RT-PCR
 cDNA
 RNA-seq

Manipulatie/onderzoekstechnieken
 RNA-interferentie
 Plasmides, kloneren, kloneringsvectoren, expressievectoren, cDNA-banken, genomische banken
 Fusie-eiwitten
 Reporter-genen (GFP)
 Inductie van bèta-galactosidase, spectrofotometer
 SDS-PAGE en Western Blot
 GST-pull down
 Co-IP
 ChIP
 CRISPR/Cas9 gene editing

(In-situ) hybridisatie
 Doel: lokalisatie RNA of DNA
 Methode:
o Inbrengen korte stukjes fluorescerend DNA of RNA
o DNA: uitsmelten
o Hybridisatie op specifieke sequentie

PCR
 Doel: DNA selecteren en vermeerderen voor onderzoek
 Methode: thermocycling
o Denaturatie: dubbelstrengs  enkelstrengs
o Annealing: baseparing primers

, o Elongation: enkelstrengs  dubbelstrengs
 Benodigdheden:
o DNA-fragment dat je wil vermeerderen
o Forward en reverse primer (die aan 3’ kant van fragment binden op beide strengen)
o DNA-polymerase
o dNTP’s
o Buffer
o Water
 Voorwaarden primers:
o Complementair aan beide kanten gen
o Niet complementair aan elkaar
o Geen interne baseparing
o 15-30 baseparen lang
o Zo veel mogelijk uit G en C

RT-PCR
 Doel: RNA selecteren, vermeerderen en vergelijken
 RNA te instabiel als fragment in PCR  RT-PCR
 Methode: maken van cDNA
o Isoleren (m)RNA
o (m)RNA  RNA/DNA met reverse transcriptase en poly-T-primer (bindt poly-A-staart)
o RNA/DNA  DNA/DNA met RNA degradatie en DNA-polymerase (RNA als primer)
 Welke cDNA’s dit oplevert is afhankelijk van de aanwezige RNA’s in het sample zaten
 Kwantitatieve RT-PCR
o Twee cDNA’s worden vermeerderd met PCR
o Toevoegen eiwit dat fluoresceert als het dubbelstrengs DNA bindt
o Hoe meer DNA  hoe meer fluorescentie
o Aantal cycli nodig om maximale fluorescentie te berijken: mate voor hoeveelheid mRNA
in sample

Plaats-specifieke mutagenese
 Doel: specifieke mutatie aanbrengen
 Methode:
o PCR met gemuteerde primer
o Primer bindt specifieke sequentie  mutatie
o Replicatie
o Verwijderen bacterieel (gemethyleerd) DNA met DNP1

Restrictie-enzymen
 Herkennen palindromische sequentie in DNA
o Sticky ends: 3’ of 5’ overhang
 5’ overhang kan blunt gemaakt worden
 3’ overhang niet
o Blunt ends: geen overhang
 Doelen:
o Inbrengen gen in expressievector
o Sequentie-onderzoek: knipt enzym wel of niet
 Methode: inbrengen gen in expressievector
o Restrictie-enzymen: knip gen uit insert vector

Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:

√  	Verzekerd van kwaliteit door reviews

√ Verzekerd van kwaliteit door reviews

Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!

Snel en makkelijk kopen

Snel en makkelijk kopen

Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.

Focus op de essentie

Focus op de essentie

Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!

Veelgestelde vragen

Wat krijg ik als ik dit document koop?

Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.

Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?

Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.

Van wie koop ik deze samenvatting?

Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper biomedstudent1. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.

Zit ik meteen vast aan een abonnement?

Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €5,49. Je zit daarna nergens aan vast.

Is Stuvia te vertrouwen?

4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)

Afgelopen 30 dagen zijn er 67096 samenvattingen verkocht

Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen

Start met verkopen
€5,49
  • (0)
  Kopen