Samenvatting
Samenvatting Hoofstuk 1: Histologische technieken
Samenvatting weefsels hoofstuk 1 bevat zowel de ppt als wat er gezegd is tijdens werkcollege
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 8 pagina's
Voorbeeld 2 van de 8 pagina's
In winkelwagenVerkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
Histologische technieken Doel: weefsels en organen observeerbaar maken voor lichtmicroscoop (LM) en elektronen
microscoop (EM)
Probleem:
weinig contrast in biologisch materiaal, grijsachtige kleuren
weinig licht (elektronen) doorlatend, te dik
Methodes:
1) Fixatie
2) Inbedden
3) Snijden
4) Kleuren of contrasteren
1. Fixeren
doden van weefsel op een manier dat de structuur behouden blijft
Bewaren van weefsels met behoud van oorspronkelijke structuur = denatureren van eiwitten =>
stilleggen van bacteriële en autolytische afbraakreacties
3D structuur eiwitverbreken = werking stil
Permeabiliseren van celmembraan
weefsel bestaat uit cellen, gaatjes maken daarin zodat fixatief er in kan (ook kleurstoffen kunnen
binnendringen)
Harder en poreuzer maken van het weefsel
van zacht weefsel kunnen geen dunne sneetjes gemaakt worden
door poreuzer kunnen kleuren binnendringen
Hoe:
Chemische fixatie: immersie (onderdompelen in fixatief) of perfusie (fixatief inspuiten) van het
weefsel met een fixatief
Vb. ethanol, azijnzuur, glutaaraldehyde, osmiumtetraoxide, formaldehyde
precitiperend fixatief: eiwitten neerslaan (alcoholen)
groslinkend fixatief: eiwitten aan elkaar vastzitten (werking stil) (formaldehyde)
Koude fixatie: invriezen van weefsel
vorm minder goed dan chemische fixatie
! Artefacten: veranderingen die tijdens fixatie in weefsel ontstaan en afkijken van de in vivo situatie
2. Inbedden
Het gefixeerde materiaal omwikkelen en doorbrengen met een inbedmiddel
Inbedmiddel:
Substantie die in het weefsel indringt
Substantie die hard wordt
Materiaal snijdbaar in dunne plakken (coupes)
Paraffine (LM), hars en plastic (EM)
komen eerst voor in vloeibare toestand, kunnen rond materiaal en binnen gaan, worden hard
Inbedmiddelen: hydrofoob – bevat veel water (paraffine mengt niet met water, weghalen)
Eerst weefsel ontwateren: weefsel in stijgende (concentratie) reeks alcoholbaden brengen:
30°, 50°, 70°, 90° en absolute alcohol
‘clearing’ in tolueen (oplosmiddel): mengbaar met alcohol en het inbedmiddel
, 3. Snijden
Door de hardheid van inbedmateriaal: snijdbaar in dunne plakken
Paraffine: 5µm (1-20µm) doorlaatbaar voor licht, LM
Microtoom met stalen mes
Hars, plastics:
50nm – 2µm: halfdunne coupes, LM
Microtoom met glazen mes (meer details dan paraffine)
70nm (60-100nm) doorlaatbaar voor elektronen, EM
Microtoom met glas- of diamantmes
4. Kleuren – lichtmicroscopie
4.1. Helderveld-LM = bright field LM
Wit licht: spectrum golflengtes (380-720nm) kleurverschillen ontstaan door verschillen in
lichtabsorptie
Contrast in coupes laag => visualisatie van cel bestanddelen en extracellulair materiaal in het
weefsel door te kleuren
Kleurstoffen: waterige oplossingen (vaak)
Zure, basische en indifferente kleurstoffen
Coupes worden eerst gedeparaffineerd (tolueen)
want water zal afgestoot worden anders door paraffine
eosine vaak gebruikt, rood om duidelijk te zien waar aangebracht
4.2. Zure en basische kleurstoffen
Routine histologische kleuring: Haematoxyline (base, blauw) – Eosine (zuur, roos) (HE)
Gebaseerd op differentiële aanwezigheid van zure (-) en basische (+) weefselbestanden
(na denaturatie)
Vb. kern: veel zure groepen, cytoplasma: veel basische groepen
Zure groep: H+ ionen afgeven
Vb. COOH in eiwitten
HPO4 in DNA en RNA
H2SO4 in cytoglycanen
Basische groep: H+ ionen opnemen
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper merelgeerts2. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €3,99. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 70055 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen