Essay
Biochemie labo: Tweecomponenten analyse van NAD en NADH/ chemie-biochemie
- Vak
- Biochemie
- Instelling
- Karel De Grote-Hogeschool (KdG)
Verslag van het labo tweecomponenten analyse van NAD en NADH voor het vak biochemie
[Meer zien]Voorbeeld 3 van de 22 pagina's
Voorbeeld 3 van de 22 pagina's
In winkelwagen
Voorbeeld van de inhoud
2021/2022Tweecomponentena
nlyse van NAD en
NADH
BIOTECHNOLOGIE 3CB
[BEDRIJFSNAAM] | [Bedrijfsadres]
, 3CB uitvoering labo: 18/10/2021
Inhoud
1. Inleiding..............................................................................................................................................2
1.1 Doel..............................................................................................................................................2
2. Procedure...........................................................................................................................................3
2.1 Reagentia......................................................................................................................................3
2.1.1 Fosfaatbuffer (1000 mL)........................................................................................................3
2.1.2 -stockoplossing (25 mL).........................................................................................................3
2.1.3 NADH -stockoplossing (25 mL)...............................................................................................3
2.1.4 -standaarden (telkens 25 mL)................................................................................................3
2.1.5 NADH -standaarden (telkens 25 mL)......................................................................................4
2.1.6 / NADH -standaard (25 mL)....................................................................................................4
2.1.7 Opmerkingen.........................................................................................................................4
2.2 Werkwijze.....................................................................................................................................4
3. Berekeningen......................................................................................................................................5
3.1 Fosfaatbuffer 0,05M met pH 7,40 (1000 mL)................................................................................5
3.2 - stockoplossing 0,05 M (1000 mL)..............................................................................................6
3.3 – stockoplossing 0,05 M (1000 mL)..............................................................................................6
3.4 - stockoplossing (25 mL) M in 0,05 M fosfaatbuffer pH 7,40........................................................6
3.5 NADH- stockoplossing (25 mL) M in 0,05 M fosfaatbuffer pH 7,40...............................................6
3.6 -standaarden (25 mL per standaard) in 0,05 M fosfaatbuffer pH 7,40.........................................7
3.7 NADH -standaard in 0,05 M fosfaatbuffer pH 7,40.......................................................................7
3.8 /NADH- standaard (25 mL)...........................................................................................................8
4. Resultaten...........................................................................................................................................9
4.1 Absorbanties van , NADH en /NADH.............................................................................................9
4.2 Absorbanties van de 5 -standaarden..........................................................................................10
4.3 Absorbanties van de 5 NADH-standaarden................................................................................12
4.4 /NADH-standaard.......................................................................................................................14
4.5 Bepaling van de onbekende........................................................................................................15
5. Besluit...............................................................................................................................................16
Referentielijst.......................................................................................................................................16
Bijlage...................................................................................................................................................17
Instructies.........................................................................................................................................17
Absorbantiespectrum , NADH en /NADH..........................................................................................19
1
, 3CB uitvoering labo: 18/10/2021
Absorbanties.....................................................................................................................................20
Absorbanties NADH..........................................................................................................................21
Absorbanties Onbekende.................................................................................................................21
1. Inleiding
Een oplossing die twee componenten bevat die onderling geen interactie vertonen, is een
oplossing waarvan de lichtabsorbantie additief is. Dit betekent dat de totale absorbantie van
het mengsel met de twee componenten bij elke golflengte gelijk is aan de som van de
afzonderlijke absorbanties van component 1 en component 2.
Stel dat er geen interactie is tussen de twee componenten van het mengsel dan kunnen de
concentraties van de componenten bepaald worden aan de hand van spectrofotometrische
metingen bij twee verschillende golflengte. Deze golflengten zijn zodanig gekozen dat bij
elke golflengte één van beide componenten sterk en de andere zwak absorbeert. Uit de
absorbantiespectra kunnen de meest geschikte golflengten afgeleid worden.
De concentraties van de componenten in het mengsel kunnen berekend worden aan de
hand van de wet van Lambert-Beer.
Ai= j ij .d . Cj
Waarbij:
A = Absorbantie
ε = molaire absorbantiecoëfficiënt (L/mol.cm)
d = lichtweg (cm)
i = golflengte aanduiding
j = component aanduiding
C = concentratie (mol/L)
Aangezien er twee verschillende golflengten worden gemeten geldt het volgde stelsel:
Ai=ε 11∗d∗C1 + ε 12∗d∗C 2
Ai=ε 21∗d∗C1 + ε 22∗d∗C 2
In het stelsel zijn C 1 en C 2 onbekend. De 4 molaire absorbantiecoëfficiënten kunnen bepaald
+¿ ¿
worden met behulp van de ijkcurven voor NAD en NADH.
1.1 Doel
Het doel van deze proef is om de concentratie van NAD+¿ ¿ en NADH te bepalen. Hierbij
zullen eerst twee golflengten bepaald worden door standaardreeksen op te stellen, een
+¿ ¿ +¿ ¿
NAD -standaardreeks, een NADH-standaardreeks en een NAD /NADH-standaardreeks.
+¿ ¿
Naast het bepalen van de concentraties van NAD en NADH wordt ook een onbekende
+¿ ¿
gegeven. Deze onbekende wordt bereid vanuit de NAD en NADH stockoplossingen.
2
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper antonmartens. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €7,99. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 52928 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen