Samenvatting
Samenvatting Biomedische fysica: elektroforese
Een volledige samenvatting van hoofdstuk 10 van biomedische fysica, elektroforese. Er staan enkele voorbeeldoefeningen in.
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 6 pagina's
Voorbeeld 2 van de 6 pagina's
In winkelwagenVerkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
H11. Elektroforese1. Inleiding
Elektroforese = een scheidingstechniek voor biologische (macro)moleculen
= scheiding van deeltjes o.b.v. het feit dat ze een andere beweegsnelheid hebben in
een elektrisch veld
➔ Bv. om eiwitten, DNA en RNA van elkaar te scheiden
Voorwaarden vooraleer iets gaat bewegen in een elektrisch veld:
▪ Deeltjes moeten geladen zijn → zo niet, dan blijven ze stilstaan
▪ Grootte
▪ Vorm
Er zijn verschillende elektroforese opstellingen mogelijk:
• De verticale opstelling
- Het elektrisch veld staat verticaal
- O.a. voor het scheiden van eiwitten
• De horizontale opstelling
- Het elektrisch veld staat horizontaal
- O.a. om DNA te scheiden
• Capillaire elektroforese
- = Een systeem met hele dunne buisjes
- Het elektrisch veld wordt aangelegd over een heel dun buisje
- O.a. om de basenvolgorde van DNA te bepalen
• …
Elektroforeseopstellingen bevatten altijd:
▪ Een elektrisch veld
▪ Een bufferoplossing → vangt pH-schommelingen op
▪ Een elektroforsekamer
→ Er wordt vaak ook gebruik gemaakt van een matrix (= een gel waarin de stalen worden
aangebracht) wat zorgt voor een gecontroleerde elektroforese
Agarose gel en polyacrylamide gel zijn 2 vaak gebruikte gels
➔ Voordelen van gebruik van deze gels:
1. Minder diffusie van de aanwezige moleculen → zo ontstaan er na de elektroforese
mooi afgelijnde + te onderscheiden bandjes (betere resolutie)
2. Minder blootstelling van de stalen aan convectie (vloeistofstromen in de buffer)
→ Door convectie zal de resolutie van het eindresultaat slechter zijn
3. Je kan de stalen laden/aanbrengen op een welbepaald startpunt waardoor alle
stalen mooi op 1 zelfde lijn starten met bewegen
→ Nadien kan je de stalen onderling goed vergelijken
4. Gemakkelijke verwerking van het resultaat
→ Je kan je staal uit de elektroforesekamer halen om er bv. een foto van te nemen
(kan niet als je werkt in een vloeistof)
, Deeltjes worden gescheiden van elkaar omdat ze een verschillende migratiesnelheid hebben
→ De migratiesnelheid van de te scheiden moleculen stijgt als:
- De elektrische veldsterkte stijgt
- De nettolading van de moleculen stijgt
- De wrijving die de moleculen ondervinden daalt
Het elektrisch veld in een elektroforesekamer is een homogeen elektrisch veld
→ De elektrische veldsterkte wordt dus bepaald door:
▪ De spanning of potentiaal (V)
▪ De afstand tussen beide elektronen (d)
2. Migratiesnelheid
Er zijn 2 krachten die inwerken op een geladen deeltje:
1) Elektrische kracht Fq of Coulombkracht Fc
➢ = De kracht die het deeltje vooruit trekt in het elektrisch veld
➢ Is afhankelijk van:
- De grootte van de lading
- De grootte van de elektrische veldsterkte (E)
2) Wrijvingskracht Ff (friction) of Fw (wrijving)
➢ = De kracht die de voorwaartse beweging van het deeltje tegenwerkt
➢ Is afhankelijk van:
- De grootte van het deeltje
- De vorm van het deeltje*
- De densiteit/dichtheid van het medium
De viscositeit van het medium
- De temperatuur van het medium
*De vorm van moleculen heeft geen grote invloed op de migratiesnelheid van kleine moleculen
➔ De vorm wordt belangrijker bij grote moleculen (bv. DNA, vezeleiwitten, …)
𝑙 ➔ Bepaalt het effect van de vorm (van grote moleculen) op de migratiesnelheid
➔ De axiale ratio = ➔ l = lengte en b = breedte
𝑏
➔ Hoe groter de axiale ratio van een deeltje, hoe trager het deeltje beweegt
DNA is negatief geladen doordat er negatief geladen fosfaatgroepen in aanwezig zijn
➔ Open of relaxed DNA migreert trager door de gel dan supercoiled DNA
→ Dus relaxed DNA zal minder ver geraken dan supercoiled DNA
➔ Negatief stoot negatief af en positief trekt negatief aan
Voor bolvormige deeltjes:
➔ f = de wrijvingscoëfficiënt = 6 . π . η . r
➔ De wrijvingskracht Ff neemt toe als de snelheid van het deeltje toeneemt
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper nimarnatin. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €7,39. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 52510 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen