Samenvatting
Samenvatting toolbox PCR
- Vak
- Biotechnologie
- Instelling
- Erasmushogeschool Brussel (EhB)
Samenvatting biotechnologie toolbox PCR
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 5 pagina's
Voorbeeld 2 van de 5 pagina's
In winkelwagenVerkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
1. PCR1.1. Wat is PCR
Polymerase Chain Reaction of
polymerase ketting reactie
Belangrijke biotechnologische tool om 1 stukje DNA (of RNA) in vitro miljoenen keer
te vermenigvuldigen in een korte tijd (een paar uur)
PCR reactie lijkt erg op de replicatie van DNA zoals die in de natuur plaatsvindt
DNA replicatie (zie knowledge 4.4): verdubbeling DNA bij celdeling
PCR reactie = in vitro versie van DNA replicatie
! veel meer dan 2x
Vermenigvuldiging stukje DNA tot miljarden kopijen
kort tijdsbestek (2-3 uur)
Diagnose ziekte, opsporen genen,…
Identificatie bacteriën en virussen e.a. micro-organismen (bv. aantonen
ziekteverwekker)
Forensisch onderzoek
Authenticiteit levensmiddelen adhv DNA
Authenticiteit levensmiddelen
1.2. Toepassingen
1.3. Ontdekking
1983: PCR ontdekt door Kary Mullis
1993: Nobelprijs scheikunde
, 1.4. Werking
PCR: 1 cyclus
Van 1 DNA kopie naar 2 kopieën
PCR = kettingreactie
Herhaling van de stappen
30 a 40x cycli
2-tal uur
1.4.1. Benodigdheden
DNA template: bevat target DNA
Primers: enkelstrengig of single-stranded (ssDNA) die target DNA afbakenen
DNA polymerase: (vgl DNA replicatie), verlengen van keten
Nucleotiden: (= dNTP’s) bouwstenen voor ketenverlenging
Buffer
Cycler: apparaat dat voor temperatuur schommelingen zorgt
1.4.2. 3 belangrijke stappen
STAP 1 : denaturatie
dsDNA (double stranded of dubbelstrengig) wijzigt in ssDNA zodat primers
kunnen hechten in volgende stap
verhogen temperatuur tot 95°C mbv thermocyler
STAP 2 : annealing (= hybridisatie)
vasthechten van primers aan ssDNA
Primers = ssDNA die target DNA afbakenen
Telkens 2 primers = primerpaar: Forward primer & Reverse primer
Temperatuur afhankelijk van primers 50 – 65°C
STAP 3 : elongatie
(= extension/ketenverlenging)
nucleotiden worden ingebouwd om nieuwe (complementaire) DNA streng aan
te maken
Temperatuursafhankelijk 70 – 74°C
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper lorevanvreckem. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €7,49. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 72042 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen