H1 : Inleiding
Biotechnologie: gebruik & manipulatie van biologische systemen ter bereiding natuurlijke
grondstoffen en biomassa
Biologisch systemen: micro-org; plantaardige/dierlijke cellen; enzymen geïsoleerd uit een
levend wezen
Niet: traditionele agricultuur en veeteelt
Fermentatie: synoniem voor gisting. Dit is de afbraak van organische stof zonder
tussenkomst van zuurstof (anaeroob)
Eerste periode
-Prehistorie-1850
-Onbewust gebruik van bacteriën en gisten bij de productie van levensmiddelen
Tweede periode
-Vanaf 1850
-Louis Pasteur ontdekt dat micro-org verantw zijn voor bepaalde chemische omzettingen
-Uitsluiting van contaminaties nog niet mogelijk
Derde periode
-Gebruik van aseptische technieken zuivere culturen
-Farmaceutische productie penicilline
Vierde periode
-Invoer recombinant DNA-technieken
-Doorbraak plant/dierlijke celculturen in productieprocessen
Biotechnologie ≠ recombinant DNA-technieken
- Biotechnologie is veel meer dan recombinant -DNA: Recom-DNA is een vb, een onderklasse
DNA manipuleren
-Gemanipuleerd DNA wordt op stabiele wijze in genoom ingebracht
-aanmaak specifieke eiwitten in industrielichaamseigen mol in grote hoeveelheden
gebruik:
1) neuro-endocriene boodschappers, lymfokines & bloedeiwitten
2) vaccins, monoklonale antilichamen & enzymen
Biologicals
=complex gnm…
-GEEN Klassiek gnm: via chemische synthese aangemaakt
-subklasse: biotech gnm: vb Insuline
Varkensinsuline: verschilt 1 AZ met humaan insuline
Immunogeniciteit
Risico op contaminaties met virale infecties
, Biotech insuline: geproduceerd in bacteriën. = humaan
insuline. Continue bron zonder risico op contaminaties
H2: Basisbegrippen/ technieken
in biotechnologie en genetica
2.1 DNA-RNA
2.1.1 DNA-structuur
Circulair DNA: bacteriële genomen, virussen, bacteriofagen
& plasmiden
-replicatie plasmide-DNA onafh. van replicatie bacterieel DNA
àOnevenredige verdeling van DNA over dochtercellen
2.1.2 Denaturatie-Renaturatie
Denaturatie
-thermisch (verwarmen)
-PH wijziging (sterk zuur/alkalisch)
-destabilisatie ureum/formamide: DNA gedurende langere periode enkelstrengig
houden
Reversibel proces
(↔ denaturatie van eiwitten = irreversibel proces)
o Tm-waarde/Tsmelt
= T waarbij helft basen in een duplex ongepaard zijn
àkenmerken
stijgt bij ↑ [G][T] gehalte : Meer H-bruggen ( GT: 3 H-bruggen ↔ AT: 2 H-bruggen)
, o Renaturatie
= bij temp 25 °C onder Tm-waarde
Detectie denaturatie: UV spectrofotometrie
o 260nm
o Dubbelstrenig:absorbeert minder bij 260nm
o Enkelstrenig:absorbeert meer bij 260nm
àBasen zijn verantw. voor UV-absorptie: door elkaars nabijheid in dubbelstreng
wordt absorbantie onderdrukt
o Tm:waar grafiek verticale stijging heeft
Detectie hoeveelheid DNA + onzuiverheden
1 OD (260 nm) = 50 μg/ml dubbesltrengig DNA
= 33 μg/ml enkelstrengig DNA
Zuivere DNA preparaten OD(260 nm)/OD(280 nm) = 1,8
à Afwijkend getal: onzuiver
à Er bestaan onzuiverheden die de afwijking zullen opheffen
Homologe renaturatie Heterologe renaturatie
Met een volledig compl. stuk identiek DNA Met een niet volledig identiek of
compl stuk DNA
Sneller indien conc. hoger Per mismatch daalt Tm met 1,4 gr
Kationen:↓elektrostatischafstoting
->renat->hogereTm
2.1.2 DNA-Replicatie
- Snelheid: 50-nucleotiden per sec
- Basisprincipe: DNA-baseparing & DNA-templating
- Enzym: DNA-polymerase
- dNTPs: deoxyribonucleotidetrifosfaten
- semi-conservatief: oude streng krijgt nieuwe streng
à replicatievork: asymetrisch -> leading & lagging streng
ontstaan: origins of replication (= DNA-seq 300 nucleotiden AT-rijk)
à initiator eiwit: binden hierop -> DNA-seq herkennen
à DNA-helicasen: binden aan initiator eiwit en halen dubbele helix uit elkaar
à Single-strand DNA-binding eiwit ( SSB): enkelstrenig DNA stabiel houden
à ringvormig eiwit: helpt DNA-polymerase vast te houden op de DNA-streng
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper Farma1912. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €7,49. Je zit daarna nergens aan vast.