Samenvatting

Samenvatting Moleculaire Biologie 1 Thema 9, moleculaire technieken

3 keer verkocht

Vak
Moleculaire Biologie

Instelling
Hanzehogeschool Groningen (Hanze)

De samenvatting van moleculaire biologie behandeld technieken die nu worden gebruikt in het onderzoek. Het gaat daarbij in op restrictie en recombinatie, mutaties, eigenetica en arrays die worden gebruikt in het lab.

[Meer zien]

Voorbeeld 3 van de 25 pagina's

Bekijk voorbeeld

Geupload op 9 april 2018
Aantal pagina's 25
Geschreven in 2017/2018
Type Samenvatting

restrictie
moleculaire biologie
recombinatie
elektroforese
ligatie
kloneren
libaries
blotten
pcr
rt pcr
sequencing
muatgenese
markers
genexpressie
homologe recombinatie
retrovirale vectoren
transforma

Instelling
Hanzehogeschool Groningen (Hanze)
Studie
Biologie en Medisch Laboratoriumonderzoek
Vak
Moleculaire Biologie

Volgen

LindaNoord

Lid sinds 7 jaar 52 documenten verkocht

€3,49

In winkelwagen

Opslaan

100% tevredenheidsgarantie
Direct beschikbaar na je betaling
Lees online óf als PDF
Geen vaste maandelijkse kosten

Moleculaire biologie 1 Samenvatng
Hoofdstuk 4:
Restricteeenerecombinatee
Herkennen dezelfde sequentee Het eerste enzym dat wordt ontdekt noemt men een prototype alles
wat daarna komt een isoschizomeer van het prototype

Neoschizomeren:
 restricte- enzym die dezelfde DNA volgorde heef als zijn template, maar bindt aan een
andere kant van de templatee
 Voorbeeld: AatII (GACGT↓C) and ZraI (GAC↓GTC)
Isoschizomeren:
 Restricte-enzymen die op dezelfde plaatsen knippen maar afomstg zijn uit verschillende
organismen worden isoschizomeren genoemd; knippen ze in dezelfde sequente, maar zijn
de knipeinden verschillend dan worden ze neoschizomeren genoemde
 Voorbeeld: HpaII (C↓CGG) and MspI (C↓CGG)

Methylering:
 DNA-methylering of DNA-methylate is een epigenetsch proces waarbij een methylgroep
(CH3-groep) aan een histon binnen het DNA-molecuul wordt toegevoegde De structuur van
het DNA veranderde Hierdoor kan het gen aan of uit worden gezete
 Methylering kan er ook voor zorgen dat restricte enzymen niet meer kunnen bindene Het is
dan een eigen bescherming tegen je eigen restricte – enzymene
 Methylate van plasmide DNA heef negateve invloed op transformate-efcicnte

Restrictekaart: Dit is een map waarin de bindingsplekken van verschillende restricte- enzymen zijn
aangegevene
Stappen oplossen:
1e Optellen van de bandjes per restricte- enzym
2e Het eerste restricte enzym in een plasmide tekenen en de bandjes optellen
3e Het tweede restricte enzym in een nieuw plasmide tekenen
4e Kijken hoe de twee plasmides in elkaar moeten passen om de bandjes te krijgen van het
double restricte- enzyme

—Electroforesee
 Gelelektroforese is een scheidingstechniek die moleculen onder invloed van
een elektrisch veld laat bewegen in een gele Negatef geladen moleculen bewegen naar
beneden waar de positeve pool (anode) zich bevindte Hoe groter de moleculen, hoe trager
ze zullen bewegen (migreren); hoe kleiner de moleculen, hoe sneller ze zullen bewegene

Restricte en ligate
 Ligase
o Wordt gebruikt voor het repareren van DNAe Ligase zorgt ervoor dat twee
complementaire DNA strengen aan elkaar kunnen worden geplakte De energie wordt
daarbij uit ATP verkregene

Plasmiden
 Bevat genen voor antbiotca resistente
 Heef een MCS
 Je kan een insert herkennen mbv blue white screening

,Blue white screening:
 Het afreken van B- gal
o X- gal wordt omgezet in X + Galactosidase
 Bij het afreken van X- gal zal een kolonie blauw worden, de kolonie zal dan geen insert
hebben opgenomene
o De X van X- gal zorgt voor de blauwe kleur
 Bij het niet afreken van X- gal zal een kolonie wit worden, de kolonie heef dan wel een
insert opgenomene
 Niet elk type plasmide kan worden gebruikt voor de blue white screeninge Hij moet het
LacZ gen hebben en niet het LacZ gene (deze zorgt namelijk voor een blauwe kleur)

Libariese
 Genomisch DNA
o Al het DNA opslaan
o Als je geïnteresseerd bent in de regulerende sequentes, of sequencen
 cDNA (copy DNA)
o Alleen de genen die op dat tjdstp in dat weefsel worden afgeschreven
o Als je geinteresseert bent in coderende sequentes voor bijve de expressie van
recombinante eiwitene
o Maken van cDNA
 Verschillende DNA sequentes in 1 soort bacterie stoppen
 Op een kolom brengen van de oplossing
 mRNA isoleren (poly-A staart+ oligo DT primers)
 wassen mRNA losmaken van de kolom
 XHol en EcoRI primer sites
 mRNA cDNA
 Amplifceren en methyleren ds cDNA (wordt in het plasmide
gebracht
o Het methyleren is van belang, omdat de restricte enzymen
anders in het cDNA knippen en dit moet niete
 Blund ends overhang
 + restrictesite met EcoRI adapter+ knippen met XHoI
 in plasmide plakken

Screenen van een
libary

,  je hebt eerste een plaat met de kolonies (phage plaque) hierop wordt een nitrocellulose flter
overeen gelegde
 De phage zal aan de flter plakkene Wanneer je het flter er vervolgens afaalt, krijg je een
replica van de plaat
 Aan het flter wordt vervolgens een 23P probe gevoegde De probe zal binden aan het DNA
van de plaque
 Het flter op een X- ray flm plaatsen
 De flm ontwikkelen en vervolgens vergelijken met de master platee

Bloten
 Northern Blot
o Hybridisate van RNA
o Detecte met probe
 Eastern blot
o Hybridizate van eiwiten
o Detecte met probes die postransitonele modifcate detecteren, bv fosforylering
 Soutern blot
o Hybridizate van DNA
o Detecte met probe
 Western blot
o Hybridizate van eiwiten
o Dectecte met antlichamen

PCRe
 Taq polymerase kan alleen kleine stukken DNA amplifceren, aspecifek dus goedkoop
o Maar er zijn veel meer polymerases met andere eigenschappen
 Reacte producten
o DNA template
o Primers
o Tris- HCl
o DNTP’ s
o MgCl2
o (Taq) polymerase

primers ontwerpen
 template 5’  3’
 complementaire streng maken 3’  5’
 primers lopen naar binnen 5’  3’
o kijken waar ze moeten plakken op template of op complementaire streng

voorbeeld:
3’ GCT 5’ Primer 2 R
5’ TCC ------------------ CGA 3’ Template
3’ AGG-----------------CGA 5’ complementair
‘5 TCC 3’ Primer 1 F

primers altjd van de 5’ naar de 3’ noteren

Dit zijn jouw voordelen als je samenvattingen koopt bij Stuvia:

Bewezen kwaliteit door reviews

Studenten hebben al meer dan 850.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet jij zeker dat je de beste keuze maakt!

In een paar klikken geregeld

Geen gedoe — betaal gewoon eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard en je bent klaar. Geen abonnement nodig.

Focus op de essentie

Studenten maken samenvattingen voor studenten. Dat betekent: actuele inhoud waar jij écht wat aan hebt. Geen overbodige details!

Veelgestelde vragen

Wat krijg ik als ik dit document koop?

Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.

Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?

Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.

Van wie koop ik deze samenvatting?

Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper LindaNoord. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.

Zit ik meteen vast aan een abonnement?

Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €3,49. Je zit daarna nergens aan vast.

Is Stuvia te vertrouwen?

4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)

Afgelopen 30 dagen zijn er 67478 samenvattingen verkocht

Opgericht in 2010, al 15 jaar dé plek om samenvattingen te kopen

Start met verkopen

Laatst bekeken door jou

Samenvatting ·

(0)

Samenvatting

Samenvatting Moleculaire Biologie 1 Thema 9, moleculaire technieken

Document informatie

Onderwerpen

Geschreven voor

Verkoper

Ontvangen beoordelingen

Voorbeeld van de inhoud