Deze samenvatting is een volledige samenvatting van het vak celcultuur gegeven in het 2de jaar biomedische laboratoriumtechnologie. De samenvatting bestaat uit info uit de powerpoints de cursus en eigen notities van in de les. De samenvatting is duidelijk opgedeeld per hoofdstuk. Volgende hoofdstuk...
Celcultuur = proces waarbij cellen van prokaryoten, eukaryoten of planten onder gecontroleerde
condities worden gegroeid (in vitro)
Praktijk: in cultuur brengen van cellen afkomstig van dierlijke cellen (incl. humane cellen)
Toepassingen:
Fysiologie en biochemie van cel bestuderen
Effet van verbindingen op cellen nagaan
Artificieel weefsel produceren
Biologisch kostbare producten synthetiseren
Historische achtergrond:
1907: Ross Harrison, eerste dierlijke celculturen
1950: doorbraak:
– Ontdekking van antibiotica
– Trypsine om cellen los te maken van cultuurflessen
– Chemisch gedefinieerde cultuurmedia
Poliovaccin: eerste commerciële product van dierlijke celkweek
HeLa: belangrijke continue celcultuur, baarmoederhalskanker
Hybridoma-technologie:
– Fusie kankercel + B-lymfocyt
– Continue productie van monoklonale antilichamen
Cel-en weefseltechnologie (tissue engineering)
Controle van omgeving:
– Fysicochemische parameters (pH, temperatuur, osmotische druk,…)
– Fysiologische parameters (voedingsstoffen)
Goede karakterisatie en homogeniteit:
– Replicaten van 1 weefsel verschillen in celtypes
– Na 1 of 2 passages wordt een homogene samenstelling bekomen
cellen ad random gemengd
o.i.v. cultuuromstandigheden 1 bepaald celtype geselecteerd
– Verschillen door mutaties goed gekarakteriseerde cellijnen ingevroren als cryostock
1
, Kostprijs en automatiseren:
– Slechts kleine hoeveelheden monster en reagentia nodig
– Legale, morele en ethische kwesties rond dierexperimenten vermeden
– Multiwellplaten, robotica voor verdere besparingen
In vitro modellering van in vivo condities: onwikkeling histotypsiche en organotypische
modellen waarbij cel-cel en cel-matrix interacties bestudeerd worden
3V’s als richtlijn in proefdieronderzoek:
Verminderen
Vervangen
Verfijnen
Beperkingen cel-en weefselculturen:
Expertise: belangrijk om contaminatie te voorkomen
Hoeveelheid:
– Grootteorde van 109
– Maximaal gramhoeveelheden
Op industriële schaal voor grotere hoeveelheden heeft veel kosten en problemen
voor opschaling
Instabiliteit: geleidelijk verlies van gedifferentieerde eigenschappen bij normale cellen
In vitro vs in vivo:
– Cellen uit driedimensionele matrix gehaald specifieke celinteracties gaan verloren
– Systemische verbindingen betrokken bij homeostatische regelingsmechanismen niet
aanwezig in cultuurmilieu
– Cellulair metabolisme niet representatief (daarom soms hormonen toegevoegd aan
medium)
waardevolle methode zolang beperkingen in gedachten worden gehouden
Hoofdstuk 2
2
, Orgaancultuur:
Embryonale organen of weefselfragmenten
Rechtstreeks uit organisme geïsoleerd
Kweek op vloeistof-gas interfase
3D weefselstructuur en functie behouden
Kunnen zelf niet delen , wel differentiëren
Gedrag van geïntegreerde weefsels bestuderen
Niet geschikt voor biochemische en moleculaire analyses
Explant cultuur:
Afkomstig van weefsel/organen rechtstreeks geïsoleerd uit organisme (vb. huidbiopt,
spierbiopten, tumorweefsels)
bekomen via chirurgische handelingen of naaldbiopsies
In vitro cultuur opstarten
Voordeel: behoud van cel-cel en cel-amtrix interacties
Nadeel: slechts beperkt houdbaar een dedifferentiatie (=gespecialiseerde functie verliezen)
Primaire cultuur:
Cultuur uit weefsel losmaken en individueel in cultuur brengen
Heterogene mix van verschillen celtypes (co-cultuur)
Mogelijkheid tot behoud van cel-cel interacties
Paracrien effect = ene celtype kan factoren uitscheiden die ander celtype beïnvloeden
Instabiel, dedifferentiatie en senescentie (verouderen)
Eindige cultuur:
Subcultivatie van primaire celcultuur
Vaak ook primaire cellen genoemd
Cellen in eindige cellijn kunnen maximaal 60-tal keer delen
Slechts beperkt in cultuur te houden owv senescentie (Hayflick limiet=korter worden van
telomeren)
uitz. Stamcellen
Continue/ geïmmortaliseerde cellijn:
Onbeperkt delende cellen
Ontstaan:
– In vivo
– Door spontane mutatie van primaire cellen
– Groeien als monolaag op substraat
– Door geïnduceerde mutatie van primaire cellen (=transformatie):
Adhesie cellen beïnvloed
Cellen in suspensie groeien sneller en in hogere celdensitieit
3
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper Arlo21. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €5,49. Je zit daarna nergens aan vast.
