BELANG V METHODEN IN BIOMEDISCH ONDERZOEK:
• Dry lab = met computer te werk gaan → goedkoper
• Wet lab = met stoffen en metingen → veel materiaal en minder toegankelijk
DOELSTELLINGEN:
• Overzicht ve aantal belangrijke methoden
→ ethische, wettelijke + veiligheidsaspecten
→ basistechnieken + nieuwe ontwikkelingen
• Chemische, biologische, fysische principes v methoden begrijpen
• Leren strategische keuze te maken voor welbepaalde methoden
→ vergelijken methodes + mogelijkheden/beperkingen
• Inzicht in belang + impact v specifieke biom methoden
• Onderzoeksstrategie opstellen om concrete biom vraag te beantwoorden
→ hoe methodes combineren?
ZEER BREED GAMMA AAN VRAAGSTELLINGEN:
Fysiologische vraagstellingen <-> pathologische vraagstellingen
Fysiologie Pathologie
Hoe werkt ons lichaam? Wat loopt er fout? Ziekten?
Niveaus:
• Organisme – weefsel – cel – subcellulair (organellen)
Onderzoek:
• Vaak mens / ook modelorganismen (staan model voor bepaalde ziekten bv. muis/fruitvlieg/gistcel/..)
• Soms culturen v menselijke cellen → cellen of weefsel zelf laten verder groeien
• Combi !
Open exploratief <-> hypothese-gedreven
• Open exploratief = onderzoek waarbij breed gezocht wordt naar antwoord zonder specifieke richting
te kiezen + gebruik maken van omnix methode (groot deel onderzoeken bv. volledige genomen)
Bv. Hoe komt het dat sommige mensen zo sterk reageren op COVID?
• Hypothese gedreven = onderzoek waarbij we een antwoord vooropstellen (hypothese) + dit toetsen
Bv. Speelt de vrijzetting v interferonen een bepalende rol bij de reactie op COVID?
,Fundamenteel / translationeel/ klinisch:
• Fundamenteel
→ gericht op gedetailleerde analyse vd moleculaire bestandsdelen + processen in cel/organisme
→ vooral de biologie
• Translationeel
→ maakt overgang tussen fundamenteel + klinisch onderzoek
• Klinisch
→ patiënt-gericht: optimaliseren diagnose + verbeteren behandeling + nieuwe geneesmiddel
→ PICO : patient – intervention – controls – outcome
Analyse in vivo / ex vivo / in vitro / in silico
• In vivo = bepaling bij levende organismen (bv. metingen lichtemp/bloeddruk)
• Ex vivo = metingen op stalen ve organisme (bv. immunohistochemie van biopt)
• In vitro = metingen in proefbuis (bv. kloneren/ celcultuur/..)
• In silicio = analyses met computer (bv. analyse genexpressiedata / studie interactienetwerk)
ONTWERP V BIOMEDISCHE EXPERIMENTEN:
Biomedisch probleem
Literatuur (peer-review)
Testbare onderzoeksvraag/hypothese
Biologisch system (gezond-ziek) / modelsysteem+moduleren
Bepaling vd variabelen (wat meten?)
Keuze van de methoden (hoe?)
Bepaling aantal stalen (power analyse) (technische/ biologische variatie) controles!
Financiering + goedkeuring
Uitvoering experimenten + statische analyse
Herhaling experiment
Conclusie
2 GROTE KLASSEN VAN METHODEN:
Methoden voor analyse : we meten iets Methoden voor modulatie: veranderen iets aan het
organisme/proefmodel
• Klinische analyse (hormonen/.)
• Isolatie, meting, sequentiebepaling DNA • Behandeling met inhibitor
• Analyse processen (gentranscriptie) • Transgenese
• RNA interferentie
,ENKELE DEFINITIES:
Woord Betekenis
Precisie = variabiliteit Maat voor reproduceerbaarheid
→ standaard deviatie / coëfficiënt v variatie
Accuraatheid Verschil tussen gemeten waarde + echte waarde
→ populatiestatistiek
Detectielimiet = gevoeligheid Kleinste waarde die met bepaald gekozen zekerheid
kan gemeten worden
Analytische range / dynamic range Gebied dar reproduceerbare gegeven geeft /
betrouwbaar
Analytische specificiteit = selectiviteit Mate waardoor andere componenten in systeem
interfereren
Analytische sensitivitetit Maat v verandering in output tov in input
Robuustheid Mate waarin methode een consistent resultaat geeft
ondanks kleine verschillen in experimentele
parameters (bv pH)
• Bepalen iets dat discrete waarden geeft • Bepalen iets dat continu kan variëren
• Bv. bepaling gensequentie binnen bereik van waarden
• Bv. identificatie interagerende eiwitten • Bv. cholesterolspiegel / suikerspiegel/ …
→ (gemiddelde/mediaan)±(standaardafwijking) eenheid
𝒔
Standaard afwijking (fout) op het gemiddelde: SEM =
√𝑵
• Herhaalde metingen verkleinen meetonzekerheid + verhogen betrouwbaarheid gem
• Metingen herhalen + gem nemen om impact v toevallige fout te verminderen
Praktijk: manuele celtelling
• Mbv telkamer
• Herhaalde telling v cellen in # kwadranten v rooster (onder microscoop) + gem nemen
• Gekende opp + diepte kwadrant → gekend volume → celidensiteit berkenen met formule
• Meer precisie
Relatieve Probabiliteit
Relatieve Probabiliteit
2de is veel beter:
• Grotere onzekerheid bij 1 0.63 0.64 0.65
0.630.66 0.67 0.68 0.64 0.65 0.66 0.67 0.68
concentratie (mg/l) concentratie (mg/l)
→ Verschillen tussen stalen minder snel duidelijk
→ Verschil met vooropgestelde concentratiewaarde ook minder snel duidelijk
SYSTEMATISCHE FOUT:
Systematische fout = herhaalbare fout v dezelfde grootte in dezelfde richting
• Instrumentele fouten
→ beperkte nauwkeurigheid ijking/calibratie (tijd/middelen beperkt)
• Methodologische fouten
→ suboptimaal gebruik v opstelling (verkeerde instellingen)
→opl: meten met 2 of meer onafhankelijke meetopstellingen
• Persoonlijke fouten
→ systematische fouten door operator/ bij voorbereiding vd stalen
→ opl: opbouwen expertise-ervaring
→ validiteit vd meting → GEEN betere nauwkeurigheid mbv gemiddeldes
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper ellaherroelen. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €6,49. Je zit daarna nergens aan vast.