Samenvatting
samenvatting- WPO
Deze samenvatting omvat alles over de slides en handleiding van de WPO van celbiologie
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 9 pagina's
Voorbeeld 2 van de 9 pagina's
In winkelwagenVerkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
WPO 2I. inleiding
histologie bestudeert samenstelling weefsels: nadruk v celtypen in weefsel = m.b.v. microscoop bekeken
celtypen = verschillen door vorm + zichtbare eigenschappen + functies
wnr cellen groeperen = weefsel
weefsel = geordende groep cellen met gelijkaardige eigenschappen verkregen door celdifferentiatie
II. correct gebruik van lichtmicroscoop
beste = om “Köhler-belichting” toe te passen
1. lichtschakelaar aanzetten (lichtsterkte)
2. preparaat in houder plaatsen (onder object)
3. lokaliseren weefsel (kleinste vergroting)
4. scherpstellen
5. velddiafragma bijna dichtdraaien
6. condensor + focus scherpstellen (beeld oculair scherp)
7. diafragmalichtvlek centreren
8. velddiafragma opendraaien tot hele veld juist belicht
9. apertuurdiafragma regelen (contrast)
10. overgaan naar hogere vergroting: herhaal stap 4-9
immersie-objectief (100x) enkel gebruiken na druppeltje immersie-olie op preparaat
II.1 het maken van tekeningen
• celgrenzen
• grootteverhoudingen ltl v celtypen
• verhouding kern/cytoplasma
• teken groepje cellen in weefselverband
• getekende vergroting
• 1cel = 2cm
III. vervaardigen van preparaten
III.1 het vervaardigen van weefselcoupes
wrm preparaten ? biologisch materiaal = weinig lichtdoorlatend + geeft weinig contrast
doel ? cellen + weefsel observeerbaar maken voor LM/EM
methode ?
1) fixeren van weefsel: zodat geen morfologische wijzigingen
doel? weefsel vastleggen in vivo toestand (=oorspronkelijke structuur) zonder artefacten optreden +
beschermen weefsel tegen autolyse, anoxie en microbiële aantasting (=3 oorzaken artefacten)
! wnr weefsel bewerkt kunnen artificiële structuren optreden ≠ overeenkomen reële situatie levende cellen!
• via chemische stoffen (=fixatieven): tijdens fixatie treedt denaturatie of ‘cross-linking’ op van
eiwitten in weefsel => werking eiwitten stilgelegd + werking enzymen (=verantwoordelijk uiteenvallen
cellen en weefsels bij isolatie uit lichaam/ na dood =>3 chemicaliën: formaldehyde + glutaaraldehyde +
osmiumtetroxyde MAAR voor paraffinepreparaten = Bouin’s fixatief: mengsel picrinezuur + formaldehyde
—>immersiefixatie: fixatie van buiten uit waarbij weefsel na isolatie uit lichaam in fixatief
ondergedompeld
—>perfusiefixatie: fixatie van binnen uit = enkel mogelijk bij proefdieren => lichaam dier
geperfuseerd + bloed EERST vervangen door NaCl DAN door fixatief (=paraformaldehyde)
• via fysische methode: weefsel gefixeerd door vriezen vloeibare stikstof: snelle diagnose pathologie nodig
, 2) inbedden: weefsel ingebed in materie hard genoeg om coupes maken => paraffine OF plastics
methacrylaat EN epon(= vooral bij EM) => HOE harder inbedmedium, HOE dunner coupes
EERST water uit weefsel verwijderen => coupes onderdompelen baden met stijgende alcoholconcentratie
= dehydratatie
DAN alcohol vervangen door oplosmiddel waarin inbedmiddel oplosbaar is => penetratie inbedmiddel
volgende fase vereenvoudigen
LAATSTE weefsel in vloeibaar inbedmiddel gelegd (vb; warme paraffine) waarna laat hard worden
! inbedmiddel MOET weefsel volledig binnendringen om goede coupes te maken ANDERS slecht zichtbaar !
3) snijden: preparaat voldoende dun om licht door te laten => coupes snijden van weefsel OF orgaan
coupes LM = 3-12 um MAAR coupes TEM = 50-100 nm
v soorten coupes: vries-, paraffine- of epon-coupes
=> dwars of overlangs snijden
• vriespreparaten: + snel proces - morfologie gaat snel kapot
1)weefsel snel vriezen in vloeibare stikstof
2)coupes gesneden m.b.v. vriesmicrotoom
3)coupes gedroogd
4)opnieuw gefixeerd (immersie organische solventer)
5)coupes kleuren (kleurstoffen/ antilichamen)
• paraffine-/ eponcoupes: + behouden langer - trager proces
als coupes ≠ rehydrateert: kleuring ≠ diep genoeg
III.2 het verwerken van celsuspensies
suspensies van losse cellen = op microscoopglaasjes gebracht d.m.v. v technieken
• uitstrijkje = gemaakt door druppeltje suspensie met voorwerpglas over 2de glaasje uitstrijken zodat
dunne film vormt + film aan lucht gedroogd + gefixeerd
• cytospinpreparaat = gemaakt door in speciaal uitgeruste tafelcentrifuge cellen te sedimenteren op
voorwerpglaasje
• celpellet = centrifugeren van celsuspensie tot vast propje cellen
IV. toepassingen van de (licht)microscoop
IV.1 histologie
= weefsels bestudeerd: zowel normale weefsels als pathologische weefsels
weefsels = kleurloos =>v kleuringen toegepast om weefsels + cellen te contrasteren
1) geïsoleerde leverparenchymcellen, rat, toluidineblauw (epon)
behandeling met enzymen (collagenase) => lever herleid tot suspensie losse cellen
bloedvat = omringd door membranen MAAR sinusoïd niet, WEL gemaakt door omringende hepatocyten
bij grote vergroting onderscheiden we ronde kern met 1/2 nucleoli + cytoplasma met donkergekleurde
“eilandjes” van organellen
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper cameroncroese. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €16,06. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 71498 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen