Samenvatting
Summary Zelfstudie: gateway cloning & gibson assembly - Genome technology and applications
samenvatting van de zelfstudie gateway cloning & gibson assembly voor het vak Genome technology and applications in het Engels.
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 15 pagina's
Voorbeeld 2 van de 15 pagina's
In winkelwagenVerkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
Gateway cloningGenome technology and applications
Explenation
A technique used to clone a gene of interest into a variety of expression systems
In vitro version of the integration and excision recombination reactions that take
place when lambda phages infects bacteria
In vivo: this reaction is done by recombination of attachment sites from the phage
(attP) and the bacteria (attB) the phage integrates into bacterial genome flanked
by new recombination sites (attL & attR)
attL & attR can recombine excision of phage from bacterial chromosome &
regeneration attP & attB
Gateway vector: contains modified version of the att sites
Gateway Technology relies on 2 reactions
BP Reaction
- Between attB sites (flanking insert) and attP sites (of donor vector)
- Reaction catalyzed by BP clonase enzyme mix
- Generates entery clone containing DNA of interest flanked by attL
- As byproduct: ccdB is excised from donor vector
, = rate limiting step formation of protein-DNA complex
Each single unit of enzyme binds to one side of one recognition site forming dimer on
each att site
The 3D conformation is different on the 2 different sites allows them to properly pair
2 dimers come together forming a complex
2. a serine residue at active side of each monomer attack the P-backbone of the DNA within
the central region results in creation of sticky end of DNA as well as a covalent bond
between protein and DNA backbone at this point the 3D conformation of the complex
changes the stands swap at the sticky ends
3. the enzyme relegates the backbones back together, the DNA is no longer covalent
attached to the enzyme free to leave and repeat reaction
LR reaction
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper paulienmeulemeester. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €2,99. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 49497 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen