🦠
Biologie Hoofdstuk 18
Paragraaf 5
Welk gen aanstaat, is vast te stellen met een DNA-microarray. Dat is een testplaat met een groot aantal
testplekken. In elke spot is een kleine hoeveelheid vloeistof gedruppeld met een groot aantal identieke
fragmenten van één menselijke gen. Elk fragment in de druppel bestaat uit enkelstrengs-DNA, en wel de
coderende streng. Hoe vindt de proces plaats?
Biologie Hoofdstuk 18 1
, Hoe vind 2D-gelelektroforese plaats
2D-gelelektroforese scheidt eiwitten eerst op het iso-elektrisch punt (pl) en vervolgens op de
molecuulmassa. Het iso-elektrisch punt is de pH waarbij een eiwit netto geen elektrische lading heeft. De
eerste scheiding vindt plaats op grond van de lading van het eiwit. De lading van een eiwit is afhankelijk van
de pH. Bij een lagere pH is die lading positief en bij een hogere pH negatief. In een gel waarover een
elektrisch veld geplaatst is, verplaatsen eiwitten zich op grond van hun lading. Op een gegeven moment
heeft een eiwit geen netto lading meer t.o.v. de gel en migreert het niet verder: eiwitten met hetzelfde iso-
elektrische punt (pl) komen daardoor in groepen bij elkaar te liggen
Een tweede gel scheidt de groepen eiwitten op grond van hun molecuulmassa. De groepen eiwitten komen
naast elkaar op de kathode van de tweede gel. Die gel werkt als stroop. Hoe groter de moleculen, des te
trager ze bewegen in het elektrische gel over de gel. Hierdoor zijn na verloop van tijd de kleinere moleculen
verder door de gel heen gelopen dan de grotere. Dat splitst de groepen eiwitten op molecuulmassa. Met
kleurstoffen maakt de onderzoeker de individuele eiwitten zichtbaar.
Biologie Hoofdstuk 18 2
, Hoe werkt massaspectrometrie
Biologie Hoofdstuk 18 3
Biologie Hoofdstuk 18
Paragraaf 5
Welk gen aanstaat, is vast te stellen met een DNA-microarray. Dat is een testplaat met een groot aantal
testplekken. In elke spot is een kleine hoeveelheid vloeistof gedruppeld met een groot aantal identieke
fragmenten van één menselijke gen. Elk fragment in de druppel bestaat uit enkelstrengs-DNA, en wel de
coderende streng. Hoe vindt de proces plaats?
Biologie Hoofdstuk 18 1
, Hoe vind 2D-gelelektroforese plaats
2D-gelelektroforese scheidt eiwitten eerst op het iso-elektrisch punt (pl) en vervolgens op de
molecuulmassa. Het iso-elektrisch punt is de pH waarbij een eiwit netto geen elektrische lading heeft. De
eerste scheiding vindt plaats op grond van de lading van het eiwit. De lading van een eiwit is afhankelijk van
de pH. Bij een lagere pH is die lading positief en bij een hogere pH negatief. In een gel waarover een
elektrisch veld geplaatst is, verplaatsen eiwitten zich op grond van hun lading. Op een gegeven moment
heeft een eiwit geen netto lading meer t.o.v. de gel en migreert het niet verder: eiwitten met hetzelfde iso-
elektrische punt (pl) komen daardoor in groepen bij elkaar te liggen
Een tweede gel scheidt de groepen eiwitten op grond van hun molecuulmassa. De groepen eiwitten komen
naast elkaar op de kathode van de tweede gel. Die gel werkt als stroop. Hoe groter de moleculen, des te
trager ze bewegen in het elektrische gel over de gel. Hierdoor zijn na verloop van tijd de kleinere moleculen
verder door de gel heen gelopen dan de grotere. Dat splitst de groepen eiwitten op molecuulmassa. Met
kleurstoffen maakt de onderzoeker de individuele eiwitten zichtbaar.
Biologie Hoofdstuk 18 2
, Hoe werkt massaspectrometrie
Biologie Hoofdstuk 18 3