Samenvatting
HPLC Samenvatting - HPLC1
- Vak
- HPLC1 (HPLC1)
- Instelling
- Hogeschool Zuyd (HZ)
Samenvatting van 8 pagina's voor het vak HPLC1 aan de HZ (HPLC Samenvatting)
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 8 pagina's
Voorbeeld 2 van de 8 pagina's
In winkelwagengesponsord bericht van onze partner
1 beoordeling
Door: sarahalagha2 • 11 maanden geleden
Voorbeeld van de inhoud
HPLC1 SamenvattingLes 1
HPLC
- Hoge prestatie vloeistofchromatografie vroeger: hoge druk vloeistofchromatografie
- Buis met pakking stationaire fase
o Pakking bestaat uit silica
Niet-gemodificeerde silica = polair Normal-HPLC (N-HPLC)
Gemodificeerde silica = apolair Reversed Phase-HPLC (RP-HPLC)
Het omzetten van N-HPLC in RP-HPLC heet endcapping. Hierbij wordt
elke OH-groep omgezet in een niet-polaire groep
Er bestaan meerdere vormen van silica
Nadeel: bij een hoge pH zal er hydrolyse van de silicagel plaatsvinden,
waardoor het niet meer geschikt is voor HPLC
Dit kun je zien door snelle achteruitgang in efficiëntie, meer
piekverbreding en verhoging van de druk
- Doorstromen met vloeistof mobiele fase
o Bestaat meestal uit water, waterige bufferoplossing, water en organisch oplosmiddel
en mengsels van organische oplosmiddelen (vaak ook in gradiënt).
o Eluent moet van tevoren ontgast en gefiltreerd worden.
Ontgassing bijv. door doorstroming met helium
Voorkomt storingen aan de apparatuur
Ook de pomp moet stofvrij zijn.
- Stof verdeelt zich over mobiele en stationaire fase
o De stationaire fase vertraagt verschillende componenten
- Je wilt hoge schotelgetallen krijgen (>10000), dus lage schotelhoogtes kleine
deeltjesdiameter (dp) pakking nodig
L
o H=
N
H = schotelhoogte
N = schotelgetal
L = lengte kolom
o Om vloeistof toch er doorheen te krijgen, is er hoge (pomp)druk nodig.
- Apparatuur
, - Pomp
o Debiet (flow) F
F tussen 10 – 10000 μL/min
Zeer constant debiet nodig in verband met detectie
o Pmax = 40 MPA
o Diverse typen pompen beschikbaar
Twee pompen die onafhankelijk van elkaar werken binair pompsysteem
Nauwkeurige regeling van de twee oplosmiddelfracties
Zeswegkraan nodig duurder
- Injectiesysteem
o Zeswegkraan waarin een zogenaamde monsterlus is opgenomen
o Monsterkraan moet bestand zijn tegen hoge drukken en ‘dode’ ruimten moet
worden vermeden om extra piekverbreding te vermijden.
o Monster wordt hierin meteen vermengd met het oplosmiddel
- Kolom
o Eigenschappen
Roestvast staal
Lengte (L) 5-20 cm
Inwendige diameter 4-5 mm
Invloed verbinding kolom-detector op de uiteindelijke piekvorm
o De dode ruimten bij aansluitingen op de kolom moeten zo klein mogelijk zijn!
- Detector
o Tegenwoordig veelal gekoppeld aan UV-detector
Hoge gevoeligheid
Groot meetbereik
Vrij ongevoelig voor temperatuursveranderingen
o Computer maakt signaal zichtbaar
Wanneer pas je welke techniek toe?
- Vluchtig monster GC mogelijk
- Monster niet vluchtig (HP)LC mogelijk
- Grote moleculen GPC mogelijk
Wanneer HPLC toepassen
- Bij sterk polaire mengsels
- Hoge molecuulmassa’s
- Thermisch instabiele materialen
- Materialen met een neiging tot ionisatie
Formules zie formuleblad
∆ t R, j , i
- Resolutie: R j ,i=
2(σ t ¿ ¿ , j−σ t ,i) ¿
L
Retentietijd: t R , i= ( 1+k i ) =t R , 0 (1+k i)
' '
-
μ
( )
2
tR
- Schotelgetal: N=
σt
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper sachagelissen. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €4,29. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 67866 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen