Garantie de satisfaction à 100% Disponible immédiatement après paiement En ligne et en PDF Tu n'es attaché à rien
logo-home
TD génie enzymatique 11,02 €
Ajouter au panier

Autre

TD génie enzymatique

 20 vues  0 fois vendu

exercices avec correction de génie enzymatique

Aperçu 2 sur 5  pages

  • 5 septembre 2023
  • 5
  • 2017/2018
  • Autre
  • Inconnu
Tous les documents sur ce sujet (4)
avatar-seller
sirineflr
Génie Enzymatique P~7P-th - >~
Exercice 1
TDn°2
<
p l-l p 1-J ê - ';,(f)

On veut séparer trois acides aminés :
L'acide L-lysine, l'acide L-glutamique et l'acide L-leucine sur une résine polystyrénique
substituée par des groupements sulfonate (-SO3).
Les pH isoélectrique des trois acides aminés sont respectivement: 9,74; 3,22 et 5,98 à 25°C.
On dépose ces trois acides aminés sur colonne à pH 2, puis on élue en ramenant
progressivement le pH à 7.
- En considérant les interactions entre les acides aminés et la résine uniquement d'ordre
électrostatiques, quels acides aminés sont élués et dans quel ordre?

Correction
Cet exo met en jeu une chromatographie échangeuse d'ions, une résine polystyrénique
substituée par des groupements sulfoniques est chargée négativement donc elle échange des
cations.
Lorsque le pH >pHi l'acide aminé est chargé négativement (forme anionique)
Lorsque le pH< pHi l'acide aminé est chargé positivement forme cationique
Le t abl eau smvant
. · ac1'des ammes
donne 1es charges des tr01s . ' a' pH 2 et a' pH 7
Acide aminé pHi Charge à pH 2 Charge à pH 7
Glu 3,22 + -
~ u 5,98 + -
Lys 9,74 + +
Ainsi à pH 2 les trois acides aminés sont chargés positivement et seront retenus sur la résine
A pH 7 seuls Glu et Leu sont élués la Lys reste fixée sur la colonne,
Donc:
Glu est élué en premier (pHi = 3,22) Leu par la suite (pHi = 5,98).


Exercice 2
Un mélange d'immunoglobuline G (MM=l60000 Da) et d'albumine sérique bovine (MM=
67000 Da) est déposé sur colonne de Sephadex (G-100) limite d'exclusion= 100000 Da).
- Tracez un diagramme d'élution Vraisemblable (DO en fonction de Ve) en indiquant le
volume mort.

Co rrection
Le diagramme est tracé en utilisant la densité optique (Do) de l' éluat en fonction du volume
d' élution des molécules.
Les IgG représentent une MM supérieure à la valeur de la limité d'exclusion de la colonne
elles seront donc éluées en premier et donneront la valeur du volume mort de la colonne
(Vm= Ve des lgG).
L'albumine de masse moléculaire égale à 67000 g/mol sera incluse dans le gel et éluée plus
tard avec un volume d'élution Ve= Vm + Ve'.



1

, (00)




albutnine




lg G
i\
/ :\

Vm Ve' albumine
(Ve)

Ve albumine

Exercice 3

- Rappelez le principe de l'électrophorèse des protéines en conditions dénaturantes.
- À partir du profil électrophorétique ci-contre, calculez la masse molaire de la protéine
inconnue.


0 dépôt
3
6 205 kDa."
,,-._
9
116 kDa.
12
=
=
..,_,
l5
)8 97,, kDa.

=
Q
·.:,
21
24
~
27 66 kDa.
30
.....6ii 33
=Q)
~
36
39
•~ •inconnue
,s kDa.
,. 42
j 45
.....
~

"'Cl
48
frmd
51
54 nug1ation
57
60


Correction

Principe
SDS - PAGE= sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis


2

Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:

Qualité garantie par les avis des clients

Qualité garantie par les avis des clients

Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.

L’achat facile et rapide

L’achat facile et rapide

Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.

Focus sur l’essentiel

Focus sur l’essentiel

Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.

Foire aux questions

Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?

Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.

Garantie de remboursement : comment ça marche ?

Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.

Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?

Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur sirineflr. Stuvia facilite les paiements au vendeur.

Est-ce que j'aurai un abonnement?

Non, vous n'achetez ce résumé que pour 11,02 €. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.

Peut-on faire confiance à Stuvia ?

4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)

51036 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours

Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 15 ans

Commencez à vendre!
11,02 €
  • (0)
Ajouter au panier
Ajouté