Samenvatting biotechnologie en gezondheid
l. Methods for manipulating DNA
Genetic engineering: gebruik van in vitro technieken om genetisch materiaal aan te
passen in het laboratorium
M.b.v. technieken als:
- Restrictie enzymen
- Gelelektroforese
- Nucleïnezuur hybridisatie
- Nucleïnezuur proves
- Moleculair klonen
- Klonen vectoren
§11.1 Restrictie enzymen en nucleïnezuren scheiding
Restrictie enzymen: herkennen van specifieke DNA sequenties en het knippen van
DNA op deze plekken.
- Wijdverbreid onder prokaryoten
- Zeldzaam in eukaryoten
- Beschermen prokaryoten tegen vijandig vreemd DNA
- Essentieel voor in vitro DNA manipulatie
Drie klasses van restrictie enzymen
- Type ll klieven dna binnen hun herkenningsvolgorde en zijn het meest bruikbaar
voor specifieke dna-manipulatie
Restrictie enzymen herkennen palindromen (omgekeerde herhalende sequenties)
- Typisch 4-8 basenparen lang (palindromen) ; EcoRI herkent een 6-basenparen
sequentie.
Restrictie enzymen beschermen cellen tegen het binnendringen van vreemd DNA.
- Vernietigen vreemd DNA
- Moeten hun eigen DNA beschermen tegen onopzettelijke vernietiging
Sommige restrictie-enzymen geven rechte uiteinden ('blunt ends'). Andere geven
ongelijke einden ('sticky ends') die ook weer makkelijk aan elkaar binden.
, Modificatie enzymen: beschermen het DNA van de cel tegen restrictie-enzymen.
Hierdoor hebben restrictie-enzymen niet de mogelijkheid om in ons DNA te gaan
knippen. Dit gebeurd door:
- Nucleotiden chemisch te wijzigen in restrictie herkenning
- Deze modificatie bestaat over het algemeen uit het methylering van DNA.
- Ons DNA is gemethyleerd.
Gelelektroforese: het scheiden van DNA moleculen op basis van grootte.
Elektroforese gebruikt een elektrisch veld om moleculen te verdelen op basis van hun
lading.
- Gellen zijn gemaakt van agarose; een polysacharide
- Nucleïnezuren migreren door de gel naar de positieve elektrode, omdat zij een
negatief geladen fosfaatgroep bevatten.
Gellen kunnen worden gekleurd met ethidium bromide en DNA kan daardoor
bekeken worden onder UV-licht.
§11.3 The Polymerase Chain Reaction
Wordt gebruikt voor het vermeerderen van genetisch materiaal
Bestaat uit drie stappen:
- Denaturatie DNA gaat uit elkaar
- Annealing hechten primer aan target sequence
- Elongation verlengen van DNA
dit wordt herhaald
Verschillende soorten PCR:
- Reverse trancription PCR (RT PCR)
kan DNA maken van een RNA template
maken gebruik van het enzym reverse transcriptase
- Kwantitatieve PCR (q PCR)
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper zomulder. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €5,99. Je zit daarna nergens aan vast.