Flow cytometrie
Examenvragen :
• Je begrijpt het analyse- en sorteringsprincipe van een multilaser flowcytometer
• Je begrijpt en kan een overzicht geven van de belangrijkste toepassingen van
flowcytometrie in de diagnostiek en in biomedisch onderzoek
• Definieer de term flowcytometrie
• Beschrijf welk type biologisch staal het meest geschikt is voor een flowcytometriche analyse
• Beschrijf welke kenmerken van een cel of partikel door een flowcytometer kunnen gemeten
worden (= optische vingerafdruk)
• Identificeer de 3 componenten (= hoofdonderdelen) van een flowcytometer (fluidica, optica
en electronica) en beschrijf hun respectievelijke functies
• Verklaar hydrodynamische focusering
• Beschrijf hoe lichtverstrooiing beinvloed wordt door de kenmerken van een cel of partikel
• Beschrijf elastische en niet-elastische lichtverstrooiing
• Beschrijf het gebruik van excitatie- en emissiespectra
• Herken verschillende manieren om flowcytometrische data voor te stellen
Klinische casus:
• 14-jarige jongen
• 10 dagen koorts, bleek in het aangezicht, algemene zwakte, diffuse erythema
• Klinisch onderzoek: splenomegalie (vergroting van de mild)
• Bloedstaal nemen: hemoglobine is normaal, witte BC normaal verdeeld en aantal
Actieve, opgeblazen cellen -> maligniteit
Heb je te maken met maligne cellen? Beste behandeling?
Met flowcytometer inzoomen op elke cel individueel
Elke cel brengt eiwitten op membraan tot expressie -> CD nummers
CD19 -> merker voor B-cel
CD34 -> voorloper hematopoetische stamcellen
flow cytometer: dot plot
1
, elke dot = 1 cel
Resultaat: jongen heeft acute lymfoïde leukemie
Flow cytometry jargon
PARAMETER
Een fysisch of chemisch kenmerk van een cel
o Cytoplasmatische korrelgrootte of kern-DNA-gehalte
Een fysische eigenschap, gemeten door een sensor
o Lichtverstrooiing of fluorescentie
Een fysische eigenschap van een cel-geassocieerd reagens
o Intrinsiek
o Extrinsiek, afhankelijk van de vraag of de eigenschap al dan niet kan worden
gemeten met behulp van sondes
Excitatie Proces waarbij E geabsorbeerd wordt
Exctincit coëfficiënt Effeciëntie waarmee opstische E geabsorbeerd wordt, afhankelijk van
(e) golflengte
Emissie Proces waarbij optische E terug vrijgesteld wordt
Quantum opbrengst Efficiëntie waarmee E wordt vrijgesteld (0-1), meestal als fluorescentie
(Q) Onafhankelijk van golflengte
Stokes shift Verschil in E tussen excitatie max en emissie max
Spectrum Verdeling van excitatie en emissie golflengtes
Flow cytometrie
-> cellen meten in vloeistof flow
-> meten van lichtsignalen
metrie : detectie van lichtsignalen, opgewekt ten gevolge van de
snelle doorgang
cyto : van afzonderlijke cellen doorheen het centrum van een, tot
een microscopisch kleine spot gefocuseerde lichtstraal
flow : wat mogelijk is door de hydrodynamische focusering van de
celsuspensiestroom in een laminaire geleidingsvloeistofstroom
2
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper AVL2. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €4,99. Je zit daarna nergens aan vast.