Tentamen (uitwerkingen)
practica 6 aislamiento de plasmido y digestion con enzimas de restriccion
practica 6 aislamiento de plasmido y digestion con enzimas de restriccion
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 7 pagina's
Voorbeeld 2 van de 7 pagina's
In winkelwagengesponsord bericht van onze partner
Verkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
lOMoARcPSD|11700591Práctica 6. Aislamiento de plásmido y Digestión con enzimas
de restricción
Bioquímica Experimental (Universidad Nacional Autónoma de México)
StuDocu is not sponsored or endorsed by any college or university
Downloaded by Answerdone (arshadhussain57172@gmail.com)
, lOMoARcPSD|11700591
0141-Bioquímica Experimental________ Facultad de Química
Grupo 6 ● Ago-Nov (2018-1) ● Optativa Disciplinaria
Tipo: Experimental ● 6 créditos L-307 / Edificio B
● Lun 4:00-6:00 p.m. y Mie 4:00-8:00 p.m.
Profesores: Dr. Euclides Ávila Chávez y Dra. Carmen Adriana Mendoza Rodríguez
Purificación y ensayo de restricción del plásmido recombinante
pET-TEM1-ompAβ-lactamasa
en células transformantes de E. coli BL21 (DE3)
Por: Gutiérrez Silvestre Jessica / Durán Iturbide Noemí Ángeles / Carrasco Mote Leonardo
Depto. Bioquímica, Facultad de Química, UNAM.
Circuito Exterior S/N, Copilco El Bajo, Cd. Universitaria. 04510 Coyoacán, México, Ciudad de México, CDMX.
Correo de correspondencia: jessi.g.silvestre@comunidad.unam.mx
RESUMEN
Se empleó el método de lisis alcalina, donde se lisan las membranas de las células mediante un
detergente SDS y un choque alcalino con NaOH y se precipita el plásmido recombinante con
isopropanol, para luego digerirlo con enzimas de restricción BamHI y NdeI debido a que el vector
utilizado en la transformación tiene dos sitios de restricción para enzimas diferentes de manera que
cortando con estas dos enzimas se libera sólo el fragmento de interés; se procedió a cargar en un gel de
agarosa al 1% teñido con EtBr y se observó con respecto a un marcador de tamaño molecular del
bacteriófago lambda digerido con HindIII. En los resultados se muestran 3 carriles con diferentes pesos
moleculares, correspondientes a: el plásmido híbrido~6456 p.b., otro fragmento con peso molecular
que corresponde al plásmido digerido con las 2 enzimas de ~5370 p.b. y un fragmento de peso
molecular de ~1284 p.b. (inserto).
Palabras clave: Endonucleasas-enzimas de restricción provenientes de Eubacterias y Arqueas.
BamHI: enzima de restricción descubierta en Bacillus amyloliquefaciens. NdeI: enzima de restricción
aislada de Neisseria denitrificans. p.b.: pares de bases.
INTRODUCCIÓN
se pueden insertar u obtener utilizando enzimas
Los plásmidos son moléculas pequeñas de ADN
de restricción (usualmente las de tipo II). Para
circular que se replican de manera autónoma en
asegurar que las bacterias transformadas poseen
procariontes. Debido a su capacidad de
el vector recombinante con la secuencia de
replicarse rápidamente, se utilizan como
interés se utiliza una técnica de monitoreo
vectores de clonación de genes de interés, el cual
genotípico: aislamiento de plásmido y
Downloaded by Answerdone (arshadhussain57172@gmail.com)
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper KimLinda. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €6,49. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 53022 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen