Histotechiek review 2
H4 fixatie
Soort fixatief
● Ken de relatie tussen fixatie, morfologie en antigeniciteit! (drieluik)
● Fysische fixatie geeft een goede antigeniciteit
● Chemische fixatie geeft een goede morfologie e.g. coagulerende of cross-linkende
fixatieven
● Een chemische fixatie maakt bindingen met het weefsel waardoor de antigenecitiet
lager wordt → omdat er minder antilichamen kunnen binden aan het weefsel sinds
deze dan al bezet zijn
Antilichamen
● Antilichamen herkennen altijd de epitope, daarom wil je graag een hoge
antigeniciteit
● Maximale en optimale antigeniciteit (fysisch) en morfologie (paraffine) willen we
krijgen
● Met magnetron en hitte kunnen de epitopen op een weefsel weer herkenbaar worden
gemaakt → antigen retrieval
● Aceton is heel mild, hoe lager de temperatuur, hoe milder het fixatief wordt om alle
eiwitten tot stand te houden
Fysische fixaties
● Gebruik van hitte en kou e.g. vloeibare CO2, magnetron etc.
● De magnetron word vooral gebruikt om de epitope bereikbaar te maken
● Patos versnelt de fixatie proces doordat moleculen hierdoor sneller bewegen
● Vries-substitutie is onder vacuüm de water mantel verwijderen in e.g. aceton/alcohol
→ dit voorkomt krimping!
● Elke oplossing heeft een kritisch punt, dit is waar een vloeistof naar de gasfase
springt
Chemische fixaties
● Tegenhangers van de fysische fixatieven
● Formaldehyde fixatieven zijn reversible, maar glutaaraldehyde fixatieven juist niet
● Met osmium en glutaaraldehyde heb je maximale fixatie en morfologie voor de
elektronenmicroscopie!
, Buffers
● Er zijn veel verschillende buffers
● Fosfaat buffer pH 7.4
● Osmolariteit = het aantal deeltjes in een buffer → dus als deze te laag is krijg je
hypotoom (lage osmose waarde), terwijl je een isotome oplossing (gelijk) wilt hebben
● De osmolariteit kan e.g. worden getest met bloed, hier zie je dan dat de bloedcellen
knappen of krimpen als er geen isotome oplossing is
● Om de osmolariteit te verhogen kun je sucrose (suiker) toevoegen om het aantal
deeltjes te verhogen
Hypertome oplossingen
● Deze resulteren in de beste morfologie (400-450 mOsm)
● Krimpen kan worden voorkomen door high-pressure freezing of door een additief toe
te voegen e.g. Bouin
● Tabel 4.2 (overzicht van kleuringen en fixatieven)
**4% formaldehyde = 10% formaline
Normaliteit
● Normaliteit gaat altijd om de H+ (lading)
● Molariteit gaat altijd om gewicht
● Elk weefsel heeft zijn eigen osmolariteit maar wordt alsnog formaline
● Spieren worden altijd opgezet omdat deze anders krimpen onder fixatie!
Alcoholen
● Alchoholen dehydreren, maar kunnen gebruikt worden als fixatieven
Appendix 1 traditionele methodes
Lipiden
● Om lipiden aan te tonen gebruik je fysische fixaties om alle vetten te behouden
● Vet kleuringen lossen op in het vet e.g. Sudan, Oil-red O (specifiek voor vetten)
● Vetten liggen verspreid over het hele lichaam
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper kelly-lan. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €6,49. Je zit daarna nergens aan vast.