Samenvatting
Samenvatting Moleculaire en biochemische technieken course 5 blok 2
Samenvatting Moleculaire en biochemische technieken course 5 blok 2
[Meer zien]Voorbeeld 3 van de 18 pagina's
Voorbeeld 3 van de 18 pagina's
In winkelwagengesponsord bericht van onze partner
Verkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
Samenvatting moleculaire en biochemische techniekenPlasmides
pBAD/HIS vector
- pBAD/HIS
o AraC
o pBAD promotor
o 6x HIS tag
- Zonder inductie
o AraC bind aan AraI en AraO site waardoor promotor niet kan binden
o Er komt geen IDH-1 tot expressie
- Met arabinose
o RNA polymerase wordt gemaakt en bind aan promotor
o AraC eiwit wordt ook gemaakt
o Induceren met arabinose
o AraC bind aan de inducer sites
o RNA polymerase kan aan promotor binden
o De HIS tag zit aan het IDH-1
o Je krijgt de tag HIS (6 aminozuren)
Zonder inductie Met inductie
,pGEX-4T1 vector
- LacI en Lac operator
o Inducer is IPTG
- TAG promotor
- GST tag wat aan het IDH-1 gaat binden
- Zonder inductie
o LacI codeerdt voor Lac reprossor eiwitten
Binden aan Lac operator waardoor er geen transcriptie kan plaatsvinden
o TAG promotor kan niet binden
- Met IPTG
o IPTG zal binden aan lac repressor eiwitten waardoor deze geblokkeerd zijn
o Nu kan de tag promotor binden
o Eerst wordt GST getransleerd en daarna MCS met het IDH-1 eiwit
o Je krijgt dus het GST fusie eiwit
Zonder inductie Met inductie
pET-15b
- BL21 cellen werken het beste met deze vector
- LacI en LacO
o LacI promotor
- T 7 promotor
- Onder inductie
o RNA polymerase wordt gemaakt
o Zal aan LAcI promotor binden maar lac repressie eiwit wordt gemaakt waardoor het
niet tot expressie komt
- Met IPTG
o IPTG bind aan lac repressie eiwitten
o In het genoom van de bacterie wordt ook LacI tot expressie gebracht
o RNA polymerase zal aan 2 promotoor binden
o T7 RNA polymerase wordt gemaakt
o 2e promotor in vector wordt geactiveerd door T7 RNA polymerase
o Nu komt IDH-1 tot expressie
, Zonder inductie Met inductie
pLysS vooral in pET-15b
- Amp en chloramphenicol
- Gen op T7 lysosomen te maken
o Lysosym komt altijd tot expressie
- Geen MCS
- Functie is het maken van lysozym
- Zonder inductie
o pLys blokkeert T7 RNA polymerase om
zo achtergrondexpressie te blokkeren
o T7 lysozym inactiveert T7 RNA
polymerase
- Inductie
o Repressors worden weggevangen
o T7 RNA polymerase wordt gemaakt en
kan aan T7 promotor binden
o IDH-1 wordt gemaakt
o Lysosym is er nog maar kan niet alle RNA polymerase wegvangen
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper linngeubbels. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €6,49. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 53068 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen