Summery:
The goal of this experiment was to synthesize (S)-( + )-ethyl 3-hydroxybutanoate from ethyl acetoacetate
and baker’s yeast. Sucrose was added to the baker’s yeast to catalyse the reaction. The product was
seperated by liquid-liquid extraction (LLE) with water and Methyl tert-butyl ether (MTBE). The product
was analyzed with IR and DLC. The IR analyses lead to the conclusion that there was Ethyl-3-
hydroxybutanoaat formed, but it couldn’t be concluded if its S(+) or R(-). The Rf value is 0.52. The
immobilization failed because a wrong enzyme has been used.
Samenvatting:
Het doel van dit experiment was het synthetiseren van (S)-(+)-ethyl 3-hydroxybutanoate vanuit ethyl
acetoacetaat en gist. Sucrose werd toegevoegd aan het gist om een catalyse reactie op gang te brengen. Het
product werd gescheiden door middel van vloeistof vloeisof extractie (LLE) met water en methyl tert-butyl
ether. Het product werd geanalyseerd met IR en DLC. Door IR-analyse kan worden geconcludeerd dat er
ethyl-3-hydroxybutanoaat gevormd is, maar er kan niet geconcludeerd worden of het S(+) of R(-) is. De Rf
waarde is 0.52. De immobilisatie is mislukt doordat er een verkeerd enzym gebruikt is.
Inleiding:
De reactie is gebaseerd op een enzymatisch gekatalyseerde reductie. NADPH (gereduceerd nicotinamide
adenine dinucleotide fosfaat) levert H+-ionen aan het ethyl acetoacetaat voor de vorming van een
hydroxylgroep.
Figuur 1: Reductie van Ethylacetoacetaat: (S)-(+)-Ethyl 3-Hydroxybutanoaat. (Lit. 1)
Werkwijze:
Het voorschrift Cursusboek Project Biokatalyse (Lit. 1) beschrijft de werkwijze van de Reductie van
Ethylacetoacetaat.
Het voorschrift EIBE European Initiative fir Biotechnology Education (Lit. 2) beschrijft de werkwijze voor
de Immobilisatie.
Week1:
Reductie van Ethylacetoactaat:
In een erlenmeyer van 1 L, voorzien van een bellenteller, met 160 mL water werd tijdens het roeren met een
grote roervlo 30.10 gr sucrose en 20.563 gr gist toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 40 minuten bij
ongeveer 30 °C geroerd. Het mengsel zag er bruin uit. Na een kwartier roeren begon het mengsel te
schuimen. Let op: 1 a 2 luchtbellen CO2 per seconde! Na de 40 minuten werd er 2 mL (0.0157 mol)
ethylacetoacetaat toegevoegd. De fermentatie suspensie werd gedurende 120 min geroerd. Er werd nogmaals
2 mL (0.0157 mol) vers gedistilleerde ethylacetoacetaat toegevoegd. De fermentatie suspensie werd voor
een periode van 7 dagen opgeslagen in een erlenmeyer van 500 mL voorzien van een stop gemaakt uit
watten.
Immobilisatie:
2
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper Genaside. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €2,99. Je zit daarna nergens aan vast.