Samenvatting
BV05MBT samenvatting
- Instelling
- Hogeschool Leiden (HSL)
Dit document bevat een uitgebreide samenvatting van de tentamenstof van BV05MBT. Alle leerdoelen worden behandeld in dit document.
[Meer zien]Voorbeeld 4 van de 31 pagina's
Voorbeeld 4 van de 31 pagina's
In winkelwagengesponsord bericht van onze partner
Verkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
Samenvatting MBT, Sarnen vatting MBT
PCR stappen :
Jenaturatie : ( by ca .
95°C )
De DNA template women
-
DNA
2
Strengen Van net Los
Annealing :( by Ca so -
65°C )
afhanuelyu
-
Annealing temperature Van de primers
-
In deice stop binder de primers aan het DNA .
Ex tense / Elongate :C 72°C )
by
Polymerase
-
de primers maauteo het
uerlengt en een DNA sequentle complemental r aan
template DNA .
DNA Replicate in de cel :
door diverse Zoals Helicase
DNA
gerepliceerd
°
wordt in vivo enzymes : .
Primase en
Polymerase .
De DNA Replicate Vindt
op de leading lagging strand
°
plaats en
' '
°
De 5 3
een
verloopt van naar en
de ander d. m.ir .
Ouaeaui
fragment en
Richt Van Replicate
ing
:
DNA door
aangemaaht
°
wordt
polymerase .
dit
enzym beweegt
het
'
over DNA van 3 naar 5 ,
Maar
synthetiseerd 3:
'
Van 5 naar
Verschillen Replicate ( Vitro ) Vs PCR ( vitro ) :
Replicate PCR
°
RNA primers °
Artifkléle DNA
primers
Helicase ( 's )
Oligo
0
°
37°C + Pola °
gboc
Pol
72°C met
tag
°
, PCR
Program ma :
stop 0 Denaturatie
96°C 5- 10min
Stop 1 Denaturation
96°C 15s -
30s
Strap -65°C her halen
2
Annealing 50 15s 30s 30 40 beer
-
-
strap 3 Ex tense 72 °C 30s
-
5min
Stop DNA 72°C 10min
4
syntheses
Annealing ( Hybridisation primer ) :
By -65°C de
annealing temp ( Ta ) afhanuelyu de
°
Ca ideate Van
. 50 .
waarby is
smelt temperature
0
De smelt temperature wordt bereuend door voor alle A ent ,
2°C te teller
en voor eine Gen C . 4°C
°
Om TA te Fwd Tm
de
juste nemen ,
wordt voor RU en primer de bereuend ,
herby
wordt 5°C Tm TA
Laagste gehaald
→
er Van de Dit wordt
je
eleutroforese
Analyse via
Agarose gel :
By eleutroforese wordt het DNA
gescheden op basis Van Grootte
°
agarose gel
een .
hanalen Porién Waardoor het DNA
Ago han
°
3- dimension ace structuur
gel een
rose is met en
grater het Template DNA des te langzamer
Hoe het door die
migreren ☐ .
us
porién en hanalen
gaat .
primer Design :
°
Primers
Zyn Oligonucleotide Complement air n .
aan de 3
'
uiteinde Van
je Template .
De 2
primers ,
Forward ( Fwd ) en Reversed CRVS) net de dubbele
Streng
,
zijn start punt voor
polymerase om
te
syntnetiseren .
°
Om een stun template te
vermenigvuldigen Zyn er
template speafieue primers nodig ,
deee
hand Primer
On twerp
je aan de Van de
design regeis :
*
Primer nucleotiden
lengte van 17 28
-
AT 's
Percentage GC 's
*
Gc tussen 60% template
40 redelyugelyuverdeeld over
-
,
en
*
'
3 end Van de met G of C
primer eindigd
* Zeit annealing
Voor nom →
complementare sequentles
* ( Tm )
Smelttemperatuur -65°C 5°C
tussen so .
primers mogen niet meerdan cut eluaar
tigger .
, Sarnen
vatting kloneren WC 3
Waaromkloneren ?
°
hloneren het DNA daar het te doer :
is manipuleren van on
volgende mee
*
Eiwit hoeueelheden produceren ( coals insulin e)
in
grote
*
Function van of onderzoeuen
genen
☐ omeinen van
genen
*
Effect van mutant en bestuderen
gen
( GFP fluorescent remanent
*
Ondereoeuen wanneer een promoter actief is
kloneer stappen :
Digest
0
ie :
DNA Cplasmide of template) met Restrict ie (RE ) hnippen Restriction enzymen
-
enzymen .
Verbreuen de Suther fosfaat teeter RE hebben does
eigenlyu defunct ie om DNA
-
,
te Knipper op speafieue sequentles en
vervolgends te lineariseren .
RE (Reversed complementair )
-
hnippen op palingdromen
Knip warranties :
RE 's
zijn te under Variates
•
in 2 :
-
sticky end / Bland
-
ends
⑥pµgµ/pµ@
Type Restrict ie
enzymen
:
°
lsoschizomeren Heruennen dezelfde
:
sequentIes
( Restrict ie sites)
Neoschizomeren : Herhennendeeelfde Anders
sequentles Maar unippen
0
,
Isocaudomeren Herhennen dezelfde
sequent es
°
:
Verschillende / ,
Maar
geuen
Sticky -
ends
Digest /e :
lean met 1 of 2
Digest ie
°
restrict ie
enzymen Worden
uitgeuoerd
Digest /e met 1 RE : Uan
Lyden tot zeif
ligate uan de plasmide of het insert is
°
Verwoerd de
in plasmid geligeerd .
Digest RE
Geeftgeen Zelf ligate
°
met 2 insert lean op 1
:
ie en Maar manier
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper felianne_2000. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €7,49. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 66579 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen