Tentamen (uitwerkingen)
Labjournaal ELISA 2 voor CIE
- Vak
- CIE (B06CIE)
- Instelling
- Hogeschool Leiden (HSL)
Labjournaal voor de ELISA die wordt uitgevoerd als toetsing. Inclusief resultaten, conclusie etc.
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 12 pagina's
Voorbeeld 2 van de 12 pagina's
In winkelwagengesponsord bericht van onze partner
Voorbeeld van de inhoud
Naam Isabel deVette
Klas BM2O-zij
Datum 11-1-2023
Thema & module BTCEI
code B06CIE
Titel experiment ELISA 2
coating
Doel van het experiment
Het coaten van de ELISA-plaat met IFNϒ.
Principes technieken
ELISA principe: er vindt interactie plaats tussen de analyt van het monster
en het antilichaam-antigeensysteem. Deze interactie kan worden
gevisualiseerd door enzymen, gekoppeld aan secundaire antilichamen of
antigenen, en geeft aan of zich een antilichaam aan een antigeen heeft
gebonden. Een toegevoegd substraat wordt door het gekoppelde enzym
omgezet met kleurverandering als gevolg. Deze kan worden gemeten met
een spectrofotometer, in dit geval bij 415nm.
Materialen en risico-analyse
Rabbitαhumaan IFNy (4g/L)
96-wells plaat (Greiner ELISA plaat)
PBS
Multichannel pipet + puntjes
Bakjes voor vloeistof voor de multichannel
Kleeffolie voor afdekken van de platen
Snijmachine/schaar voor het op maat maken van kleeffolie voor afdekken
platen
Methode
1. Verdun RαH IFNy in PBS vanuit de stock 1500x en meng goed. (Bereken
dus eerst hoeveel je nodig hebt)
Eerst PBS verdunnen --> 1mL PBS + 9mL demiwater
150µl x 48 welletjes = 7200µl, je maakt een overmaat dus 7500µl
7500/1500 = 5µl IFNy
5µl RαH IFNy + 7500µl PBS
2. Coat de helft (kolom 1 t/m 6) van de 96-wells plaat met 150 µl van deze
verdunning.
3. Dek de ELISA plaat af met folie (zelf even op maat snijden/knippen)
4. Incubeer tot ELISA2_PRT/02_ELISA bij 4°C.
1
, Naam Isabel de
Vette
Klas BM2O-zij
Datum 18-1-2023
Thema & module BTCEI
code B06CIE
Titel experiment ELISA 2
Doel van het experiment
Onderzoeken welke cellen IFN-ϒ produceren.
Onderzoeken hoeveel IFN-ϒ er wordt geproduceerd door de cellen.
Dit gebeurt met behulp van een sandwich ELISA
Verwachting van het experiment
IFN-ϒ wordt door T-cellen geproduceerd. In welke buis de IFN-ϒ wordt
aangetoond, bevatten automatisch de T-cellen. De andere buis zal dan
de B-cellen bevatten.
Principes technieken
ELISA principe: er vindt interactie plaats tussen de analyt van het
monster en het antilichaam-antigeensysteem. Deze interactie kan
worden gevisualiseerd door enzymen, gekoppeld aan secundaire
antilichamen of antigenen, en geeft aan of zich een antilichaam aan
een antigeen heeft gebonden. Een toegevoegd substraat wordt door
het gekoppelde enzym omgezet met kleurverandering als gevolg. Deze
kan worden gemeten met een spectrofotometer, in dit geval bij
415nm.
Materialen en risico-analyse
Gecoate 96-wells ELISA plaat uit PT02 coating
Supernatant van ongestimuleerde en gestimuleerde cellen uit buis A
Supernatant van ongestimuleerde en gestimuleerde cellen uit buis B
IFNY standaard (200 U/ml)
Anti-humaan-IFNy-HRP
PBS
Tween #RA 13
BSA
ELISA buffer (PBS + 0,05%Tween) (zelf vers maken)
ELISA blockbuffer (PBS/Tween buffer + 2%BSA) (zelf vers maken
ongeveer
ABTS oplossing #RA 14
H2O2 #RA 11
Stopbuffer (2% oxaalzuur) #RA 12
37°C Stoof
Multichannel pipet
Pipetten
Microplate reader
2
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper isabeldevette. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €5,49. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 52355 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen