Celbiologie
1.Techniek
inleiding
Stabiele cellijnen: afkomstig van tumoren -> immortalisatie
Contactinhibitie van celproliferatie van mitogenen
Adherente cellen splitsen:
=> trypsine: oppervlakte eiwitten splitsen
=> EDTA: calcium en magnesium losmaken
Totipotent: eerste uren na bevruchting, kan zich tot foetus ontwikkelen
Pluripotent: 4 dagen na bevruchting, blastocyst -> kan niet meer tot foetus
ontwikkelen zonder placenta
Multipotent: specifieke cellen kunnen nog tot verschillende cellen binnen een
bepaald weefsel evolueren. (bloedplaatsjes, rode bloedcellen,..)
Prepareren
Fixeren: afbraakenzymen tegengaan door denaturatie
Bevriezen: snel en behoud epitopen voor kleuring, in LM
Chemische fixatie: door formol of glutaraldehyde, betere morfologie
Veranderingen die gebeuren tijdens fixatie = artefacten
Inbedden: hard maken om te kunnen snijden
Niet bij koudefixatie
Meestal hydrofoob -> eerst water verwijderen uit cel door alcohol
Harsen zijn hydrofoob met hydrofiele groepen op -> minder stabiel
Paraffine, harsen en plastics
Snijden:
Met paraffine: voor LM, zacht coupes (5-10 micrometer)
Microtoom mes uit staal
Harsen, plastics: voor EM, hardere coupes (60-70nm), minder immuun kleuring
Microtoom mes uit glas of diamant
, Microscopen
microscoop kleuring werking
Klaarveldmicroscoop PAS = vrij suikers Breken licht
200nm aankleuren Condensor, objectief en oculair
Hematoxyline: base
Eosine: zuur
Fasecontrastmicroscoop Ongekleurde Kleine faseveranderingen door
Voor levende cellen preparaten kleine brekingsverschillen in
preparaat
Fluorescentiemicroscoop Fluorescerende Epifluorescentie: excitatielicht
kleurstoffen = korte golflengte
fluorochromen Emissie lange golflengte
Ion-gevoelige Door kwiklamp
kleurstoffen: conc Confocale laser scanning
ionen microscopie (CLSM)
Immunofluorescentie:
specifieke eiw, mbv
antilichamen
Tagging: specifieke eiw in
levende cellen
4D door time lapse
Flowcytometrie: techniek voor
tellen cellen
Transmissie Elektronen Negatieve kleuring Elektronenverstrooiing
microscoop (TEM) Zware metalen bv Zware atomen
1nm osmium: Ultradun preparaat
donker/licht Hoog vacuüm
contrast Vooral om binnenkant
Shadowing en rotary objecten te zien
shadowing: platina en
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper detantloena. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €6,59. Je zit daarna nergens aan vast.