Samenvatting
week 2 samenvatting faba204
hoorcollege + fimpjes+ werkcolleges
[Meer zien]Voorbeeld 3 van de 19 pagina's
Voorbeeld 3 van de 19 pagina's
In winkelwagengesponsord bericht van onze partner
Verkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
Hoorcollege 2 Biologische geneesmiddelenWat voor soort sequentie zet je in het “gen van interesse”?
à DNA, de coderende gensequentie:
alle belangrijke informatie van het
gen zit tussen de start en stopcodon.
Hoe kan je het gen amplificeren?
Moet je weten!:
• mRNA haal je uit
het weefsel waar
het gen tot
expressie komt
• Reverse
transcriptase
zet mRNA om in
cDNA (coding
DNA)
• Kan worden
geamplificeerd met PCR
à Cel produceert duizende genen à worden allemaal omgezet door reverse transcriptase
à De bulk van RNA in de cel is ribosomaal RNA en niet messenger RNA, maar ribosomaal
RNA wordt niet geamplificeerd met deze techniek door gebruik van poly-A staart (waar
primer aan bindt) = oligo-DT primer (moet complementair zijn)
, 1. Primer is een begin (startpunt), waaraan een enzym wordt toegevoegd die verlengt =
Reverse transcriptase
2. Je wilt alleen DNA en geen RNA, dus vervolgens voeg je RNAse toe (enzym dat
alleen RNA kan afbreken)
3. Je houdt een single strand cDNA over
PCR
1. Primer kiezen die alleen bindt aan DNA van gen van interesse (hierna dubbelstrengs
DNA)
2. Amplificatie (alleen gen van interesse) à dubbelstrengs DNA
3. Denaturatie (DNA uit elkaar à primers kunnen binden), primer binding, amplificatie
Enzym PCR: DNA polymerase (DNA naar DNA)
What is needed?
1. DNA template (in this case cDNA)
2. Primers: forward and reverse (Why??)
3. DNA polymerase
4. Deoxyribonucleotides: dATP, dGTP, dTTP, dCTP
, 3 steps per cycle:
1. Denaturation (94°): DNA from double to single strand
2. Annealing (60°): primer binds to the complementary sequence on DNA
3. Elongation (72°): DNA polymerase adds nucleotides starting from the pre-existing 3’
end of a primer. The newly made strand grows in 5’ > 3’ direction
Gen moet in plasmide met resistentiegen.
1. Plamide wordt open geknipt met
restricitie enzymen
2. Fragment heeft overhang niet in
fragment, rechte uiteinden = fragment
knippen met restrictie enzym
3. Fragment in plasmide met DNA ligase
3 types of cleavage:
1. Cleave 3’ off center: 5’ overhang (sticky end)
2. Cleave 5’ off center:
3’ overhang (sticky end) 3. Cleave in the middle:
blunt end
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper photographycuw. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €4,39. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 52510 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen