100% tevredenheidsgarantie Direct beschikbaar na je betaling Lees online óf als PDF Geen vaste maandelijkse kosten
logo-home
samenvatting scheidingstechnieken en eiwitzuivering €6,49
In winkelwagen

Samenvatting

samenvatting scheidingstechnieken en eiwitzuivering

 1 keer verkocht
  • Vak
  • Instelling

samenvatting scheidingstechnieken en eiwitzuivering 2de jaar, 1ste semester

Voorbeeld 4 van de 39  pagina's

  • 18 februari 2024
  • 39
  • 2023/2024
  • Samenvatting
avatar-seller
Scheidingstechnieken en eiwitzuivering

Hoofdstuk 1: inleiding

1. Scheidingstechnieken
= het scheiden van verschillende componenten op basis van het
verschil in bepaalde stofeigenschappen (bv. Deeltjesgrootte,
kookpunt,….)
 Filtratie: verschil in deeltjesgrootte
 Extractie: verschil in oplosbaarheid
 Destillatie: verschil in kooktemperatuur
 Indampen: verschil in fase, vaste stof in een vloeistof verkrijgen
door de vloeistof te laten verdampen, verschil in kookpunt
 Centrifugeren/decanteren: verschil in gewicht/massadichtheid,
door het snel laten draaien van het staal worden de zwaardere
deeltjes naar de buitenkant geduwd
 Elektroforese: verschil in ionlading; kan met behulp van SDS
 Chromatografie: met behulp van een stationaire en mobiele fase
maakt gebruik van verschil in oplosbaarheid, grootte, polariteit,
adsorptie en vluchtigheid


2. Chromatografie
Hierbij maak je gebruik van een stationaire en een mobiele fase

Stationaire fase (SF): stof die stilstaat = vast of vloeistof
Mobiele fase (MS): stof die beweegt = gas of vloeibaar

Je brengt een druppel van het staal aan op de SF en laat MB erdoor
lopen, afh van de affiniteit tussen het staal en de SF en MS krijg je
een resultaat
 Hiermee kan je bepalen of een stof al dan niet zuiver is
 Zuiver = 1 bol op de SF
 Onzuiver = meerdere bollen op de SF

2.1 Soorten chromatografie
Analytische chromatografie: weinig hoeveelheid staal, om
samenstelling te achterhalen
Preparatieve chromatografie: grote hoeveelheid staal, om de
individuele componenten in het mengsel in zuivere toestand te
isoleren
2.2 Dunnelaagchromatografie
Wordt gedaan op een papiertje die in een beker met de MS wordt
gebracht
Hoe verder het stipje omhoog is hoe minder affiniteit het heeft
tov de SF en MS
De SF bestaat uit een vaste fase zoals silicagel, of een vloeibare
fase zoals cellulosepoeder in water

, De MF bestaat uit een organisch solvent of mengsel van
organische solventen

Rf-waarde = de afstand van de stip/de afstand van de MS, moet
tussen 0 en 1

Vraag:
De stof met de grootste Rf-waarde heeft de meeste affiniteit
met de SF?
Fout, want deze heeft de verste afstand afgelegd

2.3 Kolomchromatografie
Hierbij laat je da MF lopen door de SF, aan de hand van de
opgevangen druppeltjes kan je bepalen waar de MF zich bevindt
 Hier kan je niet midden in het experiment stoppen om te
kijken waar de MF is bij dunnelaagchromatografie wel

Elutie: het lopen van de mobiele fase door de stationaire fase
Eluens of eluent: dit is de mobiele fase die gebruikt wordt
Eluaat: de stof die op het einde opgevangen wordt

2.3.1 Chromatogram
= verband tussen detectorsignaal en de tijd die verloopt
vanaf de start

De oppervlakte van de piek = de hoeveelheid stof

Parameters die uit chromatogram te halen zijn:
1. Dode tijd: tm of t0 = de tijd die de component nodig
heeft om door de kolom te stromen
2. Retentietijd: tr = tijd tussen begin van de scheiding
en de maximumpiek
3. Breedte van de piek gemeten aan de basis
4. Retentievolume: Vr = tr * u
5. Oppervlakte onder de piek: dit geeft de
hoeveelheid stof weer
6. Resolutie: Rs = mate waarin 2 stoffen gescheiden
worden gedurende het experiment

2.4 Indeling chromatografie afh van de aard van de MF en SF
MF = vloeistof =>
vloeistofchromatografie/liquidchromatografphy (LC)
 SF = vloeistof geadsorbeerd of gebonden aan een vast
oppervlak => vloeistof-vloeistofchromatografie (LLC)
 SF = vast => vloeistof-vastchromatografie (LSC)
 SF = ion-uitwisselingshars =>
ionenuitwisselingschromatografie (IEC)
 SF = ligand gebonden op vast oppervlak =>
affiniteitschromatografie

,  SF = vloeistof in poriën vast polymeer => size exclusion
chromatography (SEC)

MF = gas => gaschromatografie (GC)
 SF = vloeistof gadsorbeerd of gebonden aan een vast
oppervlak => gas-vloeistofchromatografie (GLC)
 SF = vast => gast-vast chromatografie (GSC)



Hoofdstuk 2: uitwisselingsprincipes

1. Adsorptiechromatografie
= een scheiding waarbij verbindingen uit de mobiele fase
adsorberen aan het actief oppervlak van de stationaire fase
= vaste stof en vloeistof

Adsorptie: het vermogen van een stof om aan zijn opp enkele
moleculen te binden
Gebaseerd op interactie tussen analyt en SF

1.1 Voorwaarden bij deze techniek
 Moleculen niet te polair
 Moleculen niet ionogeen; je wil dat ze terug loskomen
 Lage moleculemassa

1.2 Adsorbens
 Silicagel = groot aantal actieve plaatsen voor interactie met
polaire functionele groepen; de silanolgroepen maken het
zuur
Silanol kan met een organochloorsilaanverbinding reageren =
gebonden-fase pakking
 Aluminiumoxide = basisch
 Actieve kool en polystyreen = apolair, zorgen voor
londonkrachten

1.3 Silanolgroepen
Silicagel = opgebouwd uit silanolgroep die met elkaar verbonden
zijn
Elke Si kan met 4 andere atomen binden
Aan het oppervalk zijn er vrije silanolgroepen die instaat als
protondonor => de groepen gedragen zich dus zuur

Activiteit van silicagel is afh van de hoeveelheid water die
toegevoegd wordt, want H20 interageert met het opp van de
silicagel

Silanolgroepen kunnen binden met organische verbindingen =
gebonden-fase pakking of bonded-phases

, Silicagel dient hier als drager waarop een SF gebonden wordt =
verandering van polariteit

Zie pagina 13 voor reactie: meestal met een molecule die een Cl-
bevat

2. Verdelingschromatografie/partitiechromatografie
= verdeling van de stoffen tussen de niet mengbare SF en MF,
gebaseerd op verschil in oplosbaarheid in de SF en MF
= vloeistof en vloeistof

De polariteit van SF, MF en de componenten is heel belangrijk



2.1 De verschillende fases
SF = een dunne film op een vaste drager
MF = vloeistof (LLC) of gas (GLC)
De fases moeten onmengbaar zijn

2.2 Vergelijking met extractie
Scheidingsmethode wordt vergeleken met extractie maar hier
blijft de stationaire fase op zijn plaats
De mobiele fase wordt er over gegoten
Stationaire fase: heeft een polariteit die overeenkomt met die
van de analyten
Mobiele fase: heeft een andere polariteit dan die van de
analyten


Verdelingscoëfficiënt Kv = stof extractievl/stof in
oorspronkelijke vl



2.3 Verschillende soorten LLC
Normal phase LLC: stationaire fase meer polair dan de mobiele
fase => elutievolgorde van apolair (snelst) naar polair (traagst)
bv. -CN,-NH2,diolen,silicagel
Reversed phase LLC: stationaire fase minder polair dan de
mobiele fase => elutievolgorde van apolair (snelst) naar polair
(traagst) (meest gebruikt = C18 zie pagina 17)
Bv. C8,C18,fenyl

2.3.1 C18 kolom
Wordt gemaakt uit silicagel; door het binden van groepen
Sterische hinder zorgt ervoor dat er niet overal gebonden
kan worden => door endcapping met kleiner moleculen
raken toch alle plaatsen bezet

Dit zijn jouw voordelen als je samenvattingen koopt bij Stuvia:

Bewezen kwaliteit door reviews

Bewezen kwaliteit door reviews

Studenten hebben al meer dan 850.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet jij zeker dat je de beste keuze maakt!

In een paar klikken geregeld

In een paar klikken geregeld

Geen gedoe — betaal gewoon eenmalig met iDeal, creditcard of je Stuvia-tegoed en je bent klaar. Geen abonnement nodig.

Direct to-the-point

Direct to-the-point

Studenten maken samenvattingen voor studenten. Dat betekent: actuele inhoud waar jij écht wat aan hebt. Geen overbodige details!

Veelgestelde vragen

Wat krijg ik als ik dit document koop?

Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.

Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?

Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.

Van wie koop ik deze samenvatting?

Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper amber50. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.

Zit ik meteen vast aan een abonnement?

Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €6,49. Je zit daarna nergens aan vast.

Is Stuvia te vertrouwen?

4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)

Afgelopen 30 dagen zijn er 64670 samenvattingen verkocht

Opgericht in 2010, al 15 jaar dé plek om samenvattingen te kopen

Begin nu gratis

Laatst bekeken door jou


€6,49  1x  verkocht
  • (0)
In winkelwagen
Toegevoegd