Samenvatting
Samenvatting Moleculaire biologie technieken
- Instelling
- Hogeschool Utrecht (HU)
samenvatting voor het vak moleculaire biologie het technieken onderdeel. Korte sammenvatting maar hij heeft mij geholpen het tentamen te halen!
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 10 pagina's
Voorbeeld 2 van de 10 pagina's
In winkelwagengesponsord bericht van onze partner
Voorbeeld van de inhoud
Isolatie nucleïnezurenisolatie DNA
Step 1: Cell Lysis
• Openbreken celwand, plasmamembraan & kernmembraan
• Denaturatie & degradatie eiwitten (e.g. nucleases)
Step 2: DNA binding
• Blootleggen (-) lading DNA backbone
• Vormen van zoutbruggen tussen DNA (-) en silica (-)
Step 3: Washing
• Wassen van kolom om eiwitresten en zouten te verwijderen
Step 4: Elution
• Verbreken van zoutbruggen tussen DNA en silica
• Opvangen gDNA
Isolatie van RNA zelfde manier als bij DNA, maar:
- DNA contaminatie is zeer waarschijnlijk
- RNA is zeer instabiel TRIZOL stabiliseert RNA na isolatie meteen snap freeze van
samples in vloeibare stikstof
- RNase zeer stabiel DEPC toevoegen om te inactiveren
Endonuclease = knipt in het midden
Exonuclease = knipt aan het uiteinde
Nucleases knippen tussen deoxribose en fosfaatgroep (de fosfo-diester
verbindingen)
Restrictie enzymen maken viraal DNA onschadelijk knippen eigen DNA niet omdat deze
gemethyleerd is.
Isoschizomeren:
Verschillende enzymen met dezelfde herkenningssequentie en zelfde manier van knippen
Neo-isoschizomeren:
Verschillende enzymen met dezelfde herkenningssequentie maar verschillende manier van knippen
, Ligases
Sticky-end dna streng waar een complementair deel aan kan plakken
Blunt-end niet sticky-end de nuclease knipt in een rechte lijn en blijft niet over om nog iets aan te
plakken
Er is een palindroom nodig om te kunnen knippen
Gelelektroforese:
Scheiding op basis van grootte van DNA moleculen, kleine fragmenten lopen het snelst.
Lading van DNA negatief
SYBRsafe zorgt ervoor dat het DNA zichtbaar wordt in de gel. Doordat het tussen basen hecht het
DNA is te zien als bandjes op de gel.
Agarose gel concentratie agarose bepaald dichtheid.
Laag % voor scheiding grote fragmenten.
Hoog % voor scheiding kleine fragmenten.
Polyacrylamide gelelektroforese (PAGE)
Veel hogere dichtheid dan agarose scheiding tot op 1 nucleotide
nauwkeuring!
Ontwikkeld voor eiwitscheiding
Verticaal
Pulse-field elektroforese voor zeer grote fragmenten
Afwisselende richting van elektrisch veld, DNA fragmenten moeten zich steeds opnieuw richten
(remt af) fragmenten tot 2 mb gescheiden
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper esrahelfrich. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €2,99. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 79202 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen