Samenvatting
Samenvatting Moleculaire diagnostiek minor HAN
- Instelling
- Hogeschool Arnhem En Nijmegen (HAN)
Samenvatting van moleculaire diagnostiek minor HAN Nijmegen
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 10 pagina's
Voorbeeld 2 van de 10 pagina's
In winkelwagengesponsord bericht van onze partner
Verkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
Moleculaire diagnostiekLes 1
Moleculaire diagnostiek hebben we het over de analyse van het aantonen van DNA en RNA-
moleculen. Heel soms worden er nog wel eiwitten meegenomen maar bijna niet.
Het is een analyse van nucleïnezuren en dan vooral RNA en DNA.
We kunnen te maken hebben met directe of indirecte diagnostiek. Bij direct ben je het
gen/genoom/eiwit aan het aantonen of een pathogeen direct aan het aantonen. Dit is bij CHP
erg belangrijk. Bij de indirecte methode ben je de respons op iets aan het aantonen.
Voor- en nadelen van de directe en indirecte methodes:
- Bij de isolatie van pathogenen is het nadeel dat de kweek lang duurt en voordeel is dat het…
- Bij de antigenen/antilichamen en eiwitten hierbij is de reactie antigen-antilichaam heel
belangrijk omdat je dan kan zien dat specifieke eiwit is aanwezig. Je kunt niet direct zien of
het nieuw is of niet en moet je dus een aantal keer vergelijken waardoor dit een nadeel is van
deze methode.
- Bij het aantonen van een antilichaam gebruik je een ELISA bijv. door een fluorescentie
niveau weet je dan hoeveel antilichaam er aanwezig is.
- Bij de eiwit detectie kun je een MALDITOF gebruiken maar ook een Immuuno kleuring. De
MALDITOF is heel snel waardoor dat een voordeel is maar de prijs om een MALDITOF aan
te schaffen dat is wel prijzig.
- Bij de Genome detectie wordt er gebruik gemaakt van een PCR, RT-PCR of sequencing.
Voordeel is dat PCR niet heel duur is maar als je bijv. de sequencing erbij doet dan kost het
weer meer, het is heel specifiek en je krijgt heel veel informatie. Maar het kost heel veel tijd
om alle data te bestuderen.
De belangrijke aspecten van een diagnostische test
- Het moet heel specifiek zijn
- Het moet nauwkeurig/robuust zijn. (Onder welke omstandigheden je de test uitvoert het
resultaat moet altijd hetzelfde zijn.
- De kosten zijn belangrijk.
- Snelle testen willen we graag omdat we graag het minste tijd besteden aan de test.
- Gevoeligheid is ook belangrijk omdat als je iets wilt aantonen van bijv. een genetische
aandoening moet je wel iets kunnen aantonen met de test.
, - Niet al te ingewikkeld en dat de meeste lab personeel het wel allemaal kan. Ze kunnen het
erop trainen
- Geschikt lab is ook belangrijk, heb je alle benodigdheden om de testen uit te voeren. En ook
alle apparatuur is belangrijk die je nodig hebt.
Nucleïnezuur analyse
Je moet beginnen met het isoleren van de nucleïne zuren. Hierbij maakt je
bijv. weefsel kapot door middel van bijv. enzymen. Je hebt bij de PCR
altijd DNA nodig waarna je dan sequencing kan uitvoeren.
Je hebt voor het proces van de isolatie in het lab een apparaat namelijk een
automated NA isolatie. Hierbij worden van die magnetische bolletjes
gebruikt die het nucleïne zuur kunnen binnen, ze kunnen door middel van
een magneet die bolletjes op de bodem houden waardoor het wassen
makkelijker gaat. Dit apparaat werkt met 96 wells platen hierbij kun je een
aantal verschillende wells platen erin plaatsen. Het voordeel van dit
apparaat is dat het altijd op dezelfde manier wordt uitgevoerd. Controle zijn
heel belangrijk in de diagnostiek, want als iets negatief is weet je niet zeker
of het negatief is of dat er toch iets mis was gegaan. Als er dan iets mis is
gegaan moet je het opnieuw uitvoeren.
Na het isoleren komt er een analyse stap. Dit wordt niet vaak meer gebruikt omdat isoleren
toch vaak met een apparaat wordt uitgevoerd. Als je de kwaliteit en kwantiteit wil bekijken
dan gebruik je een UV-spectrofotometer. Of als je het wel kijken op de een gel waar het
desbetreffende gen ligt dan gebruik je dus gel elektroforese. Vaak wordt er toch gebruik
gemaakt van een amplificatie analyse stap waarbij een PCR of sequencing wordt uitgevoerd.
PCR-amplificatie
Het verschil tussen de conventionele en een real-time PCR?
Een conventionele PCR is kwalitatief en soms semi-kwantiteit. De Q-PCR (real-time PCR) is
quantitatief. Dit geeft aan hoeveel input aan bijv. DNA erin zat.
De conventionele PCR is goedkoper, omdat je primers toevoegt en dan op gel zetten en dan
bandje bekijken. Dit is een open manier.
Q-PCR is duurder omdat je er fluorescentie aan de primers toevoegt omdat je het in de gaten
wilt houden. Het is een gesloten systeem en gebruikt ook geen gel.
Bij de conventionele doe je ongeveer 40-45 cycli, deze PCR is gevoeliger.
Bij de Q-PCR volg je de reactie in real time waar je benieuwd bent naar de exponentiële fase,
deze PCR is minder gevoelig.
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper loisjansen2000. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €8,66. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 64450 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 15 jaar dé plek om samenvattingen te kopen