Dit is een samenvatting van het vak Biochemie, wat gegeven wordt in het 2e leerjaar van de opleiding BML. De samenvatting bevat ook een deel van de praktijk over cytochrome c die ik had. Als laatste bevat de samenvatting alles wat ik nog wist van de toets die ik had gemaakt! Soms met letterlijk de ...
Cellen bestaan uit: vetten, nucleïnezuren, koolhydraten, eiwitten en kleine
moleculen.
Eiwitten zijn: enzymen, structuur (botten), mechanische werking (spieren),
sensoren (reuk), bescherming (immuunsysteem), etc.
Een eiwit = een polypeptide. Aan het ene einde van het eiwit zit een
aminogroep (N-terminus) en aan de andere een carboxylgroep (C-terminus).
Het vouwen van eiwitten wordt bepaald door interacties tussen aminozuren
onderling of met het oplosmiddel. De vouwing is bepalend voor de functie van het
eiwit.
De vouwing kan verstoord worden door: verandering in pH, zoutsterkte, temperatuur of de
aanwezigheid van ureum, guanidine, thiolreagentia, apolaire oplosmiddelen, zware metaalionen of
door oxidatie (met name cysteïne).
Eiwitzuivering bestaat uit:
- Homogeniseren & extractie
o Centrifugeren
Precipitatie (fractioneren)
Chromatografie: gelfiltratie (uitsluitingschromatografie),
ionenwisselaar, affiniteit, hydrofoob.
o Membraanfiltratie
o Vriesdrogen
Homogeniseren: openbreken van cellen d.m.v. osmotische shock (cellen barsten open), freeze/thaw,
enzymatisch indien celwand, potter Elvehjem/ dounchen, vermalen met zand/glaskorrels, French
press (cellen knappen kapot), blender, ultrasoon trillen.
Hierbij moet activiteitsverlies voorkomen worden door bijv. verandering is temperatuur of pH,
oxidatie of de aanwezigheid van zware metalen of vrijkomende proteasen.
Een membraangebonden eiwit moet worden gesolubiliseerd: eerste oplossen uit het membraan
door het gebruik van een geschikt detergens.
Soorten detergentia:
- Triton x-100, Tween en NP-40: milde detergentia. Non-ionic = geen eiwitdenaturatie.
- SDS en cholaat: sterke detergentia. Ionic – eiwitdenaturatie.
Centrifugeren: wordt gedaan om
- Precipitaten te verwijderen
- Specifieke cellen uit suspensies, celorganellen, eiwitcomplexen en membraanfragmenten te
isoleren.
- Met analytisch centrifugeren kan het Mw van de eiwitten bepaald worden.
Methoden van centrifugeren
- Differentiële: Bij wateroplosbare eiwitten worden de organellen opengebroken. Bij
membraaneiwitten wordt gesolubiliseerd. Bij deze vorm van centrifugeren worden de
componenten gescheiden in een supernatant en een pellet.
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper sharonbootsman. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €3,99. Je zit daarna nergens aan vast.
